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柱式病毒DNA提取试剂盒(柱式病毒DNAout)
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/10/12 15:28:17更新时间：2024/8/2 10:38:55
产品摘要：柱式病毒DNA提取试剂盒(柱式病毒DNAout)操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。灵敏度高，通过PCR检测到的终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。安全无毒，不需要使用苯酚和等有机溶液。如果加上病毒离心富集步骤，多可以处理1.5 mL液体病毒样品。与PCR和荧光PCR兼容。价廉物美，性价比远高于国外同类产品。
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详细内容
柱式病毒DNA提取试剂盒(柱式病毒DNAout)
本产品是在基因一管式病毒DNAOUT的基础上开发的、门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子（咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等）中提取微量病毒DNA 的产品，它具有下列特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过PCR检测到的终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用苯酚和等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
5. 与PCR和荧光PCR兼容。
6. 价廉物美，性价比远高于国外同类产品。
7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
| 成份 | 大扁盒包装 |
| DNA病毒裂解液 | 30mL |
| 上柱结合液 | 40mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液3.0 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
运输及保存：
常温运输及保存，DNA病毒裂解液长期（1月以上）放置时需要放 4℃，有效期一年。
常温运输及保存，DNA病毒裂解液长期（1月以上）放置时需要放 4℃，有效期一年。
自备试剂：
无，但需要自备 RNase-free 的1.5 mL离心管（耗材）。
无，但需要自备 RNase-free 的1.5 mL离心管（耗材）。
1. 如果有N个样品，标记 N+2个1.5-2 mL螺旋盖塑料离心管(如 SarstedtCAT#:782.694.006)，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记，以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入0.2 mL液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等），阳性对照和阴性对照。
1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入0.2mL自备生理盐水中挤压出液体，然后取0.2mL进行提取。
1.2、 如果是粪便等半固定样品，则取约0.3mL的样品，加入0.3mL自备生理盐水，震荡重悬，离心取0.2mL上清进行提取。
1.3、 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的病毒DNA中会有少量细胞的基因组DNA污染（但不影响 PCR）。血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入 ACD 会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。血浆好按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
1.4、 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用 0.2mL 上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下后得到的病毒DNA不可避免的会含有少量基因组DNA污染（但不影响 PCR 检测）。
1.5、 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用1.5 mL上述方法得到的液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟, 移弃1.3 mL、用剩下的0.2mL 继续操作。
2. 加入0.6 mL DNA 病毒裂解液到各离心管中，振荡30混匀后室温放置10 分钟裂解病毒。
注意：DNA病毒裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 加入0.8mL上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8mL）到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12,000 rpm 室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余的另外一半裂解液（0.8mL）转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6. 12,000 rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 加入0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤，可以跳过。
9. 12,000 rpm 室温离心1分钟（干甩），弃含穿透液的离心管。
10. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5 mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100 uL DNA 洗脱液3.0，然后室温放置2 分钟。
11. 12,000 rpm 室温离心1分钟，离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
12. DNA 样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。
注：病毒提取的核酸量远不足以电泳检测，提取后可通过PCR检测，灵敏度可以达到30-50 拷贝/mL。
柱式病毒DNA提取试剂盒(柱式病毒DNAout)仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于其他用途。
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