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柱式海洋动物DNA提取试剂盒(柱式海洋动物DNAout）
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/10/12 15:40:37更新时间：2024/8/2 10:38:55
产品摘要：柱式海洋动物DNA提取试剂盒(柱式海洋动物DNAout）使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用苯酚等有机试剂。应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。
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详细内容
柱式海洋动物DNA提取试剂盒(柱式海洋动物DNAout）
本产品是在柱式动物DNAout试剂盒基础上优化改良而得，门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
本产品主要特点是:
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用苯酚等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。
| 成份 | 大纸盒包装 |
| 柱式海洋动物DNAout溶液A | 15mL |
| 柱式海洋动物DNAout溶液B | 15mL |
| 柱式海洋动物DNAout溶液C | 13mL |
| 蛋白酶K溶液（20mg/mL） | 1mL |
| 硅胶模离心吸附柱 | 50个 |
| 通用洗柱液 | 15mL |
| DNA洗脱液3.0 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
运输及保存：
常温运输和保存，但蛋白酶K溶液(20mg/mL)需要低温运输，-20℃保存， 有效期一年。
常温运输和保存，但蛋白酶K溶液(20mg/mL)需要低温运输，-20℃保存， 有效期一年。
自备试剂：
无水乙醇、RNase A溶液（100mg/mL）
无水乙醇、RNase A溶液（100mg/mL）
使用方法
注意：使用请先在柱式海洋动物DNAout 溶液C中加入17mL自备的无水乙醇，在用洗柱液中加入60mL的自备无水乙醇。
注意：使用请先在柱式海洋动物DNAout 溶液C中加入17mL自备的无水乙醇，在用洗柱液中加入60mL的自备无水乙醇。
1. 切取不多于30 mg的海洋动物组织材料，放入装有200μL柱式海洋动物 DNAout 溶液A的离心管中，涡旋振荡15。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入 40μL RNase A（10mg/mL）溶液，振荡15，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至海洋动物组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同动物组织裂解时间不同，通常需0.5-2 小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15。
3. 加入200μL柱式海洋动物DNAout溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：加入柱式海洋动物DNAout溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4. 在混合液中加入200μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个硅胶膜离心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000 rpm（~13,400×g）离心30，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μL柱式海洋动物DNAout溶液 C，13,000rpm（~13,400×g）离心30，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μL用洗柱液，12,000 rpm（~13,400×g）离心30，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复上步操作一次。
9. 将硅胶膜吸附柱放回收集管中，12,000 rpm（~13,400×g）离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的用洗柱液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的用洗柱液去除，否则其中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR 等）实验。
10.将硅胶膜离心吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μL用DNA洗脱液，室温放置2-5分钟，12,000 rpm（~13,400×g）离心1分钟，将溶液收集到离心管中。
注意：用DNA洗脱液的体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm（~13,400×g）离心1分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA 产物应保存在-20℃，以防DN降解。
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