口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒(含蛋白酶K)
本试剂盒适合于从口腔/咽拭子中分离纯化基因组DNA,整个过程简单方便,可在2 h内完成单个或多个样本的提取工作。本试剂盒采用特制的进口DNA吸附柱和独特的缓冲液系统,各种来源的样品裂解消化处理后,DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜(特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸),再通过一系列快速的漂洗、离心步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,后低盐的洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅基质膜上洗脱。一般1个口腔拭子可提取0.5-3.5 μg DNA,纯化后的DNA无杂质和PCR抑制剂,可直接用于PCR分析。
请务必在使用本试剂盒之阅读此注意事项
◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇ 开始实验根据需要将水浴预热备用。
◇ 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却至室温即可使用。
◇ 结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◇ Poly Carrier使用方法:如果起始处理量很少(口腔咽拭子上收集到的细胞很少),推荐使用Poly Carrier,如果预期有较大量DNA产量,用户可以根据需要选择是否加入Poly Carrier。使用时在每个样品提取所需400μL结合液CB中加入4 μL Poly Carrier,将结合液CB与Poly Carrier溶液充分颠倒混匀即可(结合液CB容易起泡沫,请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量,在总共需要的结合液CB中加入总共需要的Poly Carrier混匀备用。混合液在室温24 h内稳定。
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化等影响,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。
◇ 次使用请先在漂洗液WB中加入无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◇ 取样:取一根医用消毒棉签(手不要碰触脱脂棉部位),伸进口腔,紧靠脸颊内侧来回刮拭20次(不时旋转棉棒),需充分接触口腔粘膜。
◇ 注意事项:避免用手触及棉签,采集可先用清水轻轻漱口。为防止样本被食物或者饮料污染,取样30 min内应该避免进食或者饮水。
◇ 关于平衡液的使用:取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中,取100μL的平衡液至吸附柱中。12,500rpm(14,500×g)离心1 min,倒掉收集管中废液,将吸附柱重新放回收集管。此时平衡液预处理吸附柱完毕。平衡液在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37 ℃使沉淀完全消失。
口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒(含蛋白酶K)仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于其他用途。