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植物总RNA提取试剂盒(离心柱型)
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/10/16 14:36:46更新时间：2024/8/2 10:39:08
产品摘要：植物总RNA提取试剂盒(离心柱型)适合于从10~200 mg普通植物中提取总RNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚抽提，整个提取过程只需20~30 min。试剂盒采用DNase I膜上消化，可高效地去除DNA，得到的RNA可直接用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A纯化，核酸保护和体外翻译等实验。
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详细内容
植物总RNA提取试剂盒(离心柱型)
产品组成：
| 组分 | 规格（50 次） |
| 裂解液 PRL（Buffer PRL） | 40 mL |
| 去蛋白液 PRW（Buffer PRW） | 60 mL |
| 漂洗液 PRW1（Buffer PRW1） | 20 mL |
| 无 RNA 酶双蒸水（RNase-Free ddH2O） | 10 mL |
| RNase-Free DNase I | 550 µL |
| DNase Buffer | 5 mL |
| RNase-Free FlaPure RNA Columns | 50 个 |
| RNase-Free FlaPure gDNA Remove Columns | 50 个 |
| 收集管（Collection Tubes（2.0 mL）） | 100 个 |
保存条件：
本试剂盒中RNase-Free DNase I和DNase Buffer置于-20℃保存，其余组分常温（10~25℃）保存18个月。
产品简介：
本产品适合于从10~200 mg普通植物中提取总RNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚抽提，整个提取过程只需20~30 min。试剂盒采用DNase I膜上消化，可高效地去除DNA，得到的RNA可直接用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A纯化，核酸保护和体外翻译等实验。
操作简便：20~30 min 内完成数个样品的总 RNA 提取；
高效去除基因组 DNA：DNase I膜上消化，高效去除DNA；
安全低毒：无需酚、有毒试剂；RNA纯度高：提取的RNA无杂质残留，适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。
本产品适用于普通植物样品的总RNA 提取。
1. 使用应在漂洗液PRW1中加入4 倍体积的无水乙醇；
2. DNase I 工作液的配制：10 µL DNase I + 60 µL DNase Buffer，轻轻吹打混匀，现用现配；
3. 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染，经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌、汗液及RNase等，可能导致RNA降解；
4. RNA在裂解液PRL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在 0.5 M NaOH中浸泡10min，然后用水彻底清洗、灭菌；
5. 配制溶液如50%、70%乙醇应使用 RNase-Free ddH2O（将水加入干净的玻璃瓶中，加DEPC至终浓度为0.1%(V/V)，混匀放置过夜后高压灭菌）；
1. 样品处理：用液氮将植物样品研磨成细小粉末。称取 10~200 mg 粉末至 1.5~2.0 mL 预冷的离心管中（加裂解液样品不能解冻，初次使用推荐样品量为 30~50 mg，根据结果再调整用量）；
2. 立即加入600µL Buffer PRL及20 µLβ-巯基乙醇（自备）至样品中，高速涡旋20~60 s混匀样品，室温静置5 min；
3. 室温下14,000×g 离心5 min；
4. 将 RNase-Free FlaPure gDNA Remove Column 装在2 mL收集管中，把上一步的上清液转移至柱子中。12,000×g 离心1 min，弃去柱子，保留滤液；
5. 取 0.5 倍体积无水乙醇加入滤液中，用移液枪吸打3~5 次；
6. 将 RNase-Free FlaPure RNA Column 装在2 mL 收集管中。取上一步混合液（≤750 µL）至柱子中。12,000×g 离心1 min；
7. 弃滤液，把柱子装回收集管中。取剩余混合液至柱子，12,000×g离心1min；
8. 弃滤液，把柱子装回收集管中。加入500µLBuffer PRW，10,000×g离心10 s；
9. 弃滤液，把柱子装回收集管中，加入70 µL配置好的DNase I 溶液至柱子膜中央（DNase I 溶液：10 µL DNase I+60 µL DNase Buffer，轻轻吹打混匀）。室温放置 15 min。
10. 加入500 µL Buffer PRW，室温静置1min，13,000×g 离心1min；
11. 弃滤液，把柱子装回收集管。加入500µL Buffer PRW1（已添加指定量无水乙醇）至柱子中，10,000×g 离心10 s；
12. 重复步骤11；
13. 弃滤液，把柱子装回收集管。13,000×g离心2min，开盖置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残留的漂洗液；
注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液的残留，可能会影响后续的 RT 等实验。
14. 将柱子转移至 1.5 mL 离心管。加入30~100 µL RNase Free ddH2O至吸附膜中央。室温静置
3 min。12,000×g离心1min（柱子小的洗脱体积是30µL，若RNA产量超过 30µg，推荐进行第二次洗脱）弃去柱子，将洗脱的RNA置于-80℃保存。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，植物总RNA提取试剂盒(离心柱型)不得用于其他用途。
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