5min速病毒RNA提取试剂盒
描述:
本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从病毒液样本中纯化出高纯度的总 RNA。该试剂盒是目上操作步骤少、用时短的病毒RNA提取试剂盒(仅需要5分钟)。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量 PCR 检测等多种分子生物学实验。
(1) 本试剂盒中的Washing Buffer中已经加乙醇,无需单独添加。
(2) RNA LB1和RNA BB2均具有腐蚀性,注意防护。
使用方法(1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理)。
液体样本:血清、血浆、唾液、痰液、尿液、细胞培养病毒上清液等液体样本直接吸取150μl 到1.5ml EP管中,并加入120μl RNALB1,漩涡混合均匀10。打开1.5ml EP管盖,并加入500μl RNABB2中,漩涡混合均匀10。倒入吸附柱中,13000rpm离心30,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
抗凝全血:直接吸取150μl 到1.5 ml EP 管中,并加入120μl RNALB1,漩涡混合均匀 10 。打开 1.5 ml EP 管盖,并加入 500μl RNABB2 中,漩涡混合均匀 10 。13000 rpm 离心 30 后,将上清液倒入吸附柱中,13000rpm 离心 30 ,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
固体样本:组织、粪便等样本。取 10~100mg 固体材料样本,加入到300μl RNA LB1 中(1.5ml EP 管),并加入几粒钢珠(一般3~4 粒),置于组织研磨仪中,研磨 1 分钟。研磨完毕后,打开管盖,向匀浆液中加入 750μl RNA BB2,并 13000 rpm 离心1分钟。打开管盖,用1ml 吸头吸取 750μl 上清液到吸附柱中。13000rpm离心30 ,倒掉过柱废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
洗涤和洗脱:
上述裂解/上柱操作完毕后,向吸附柱中加入 500 μl WashingBuffer,13000 rpm 离心15,并倒掉过柱废液。重复此洗涤步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O,室温放置1 min,13,000rpm 离心1min,洗脱液即为提取的病毒 RNA,冷冻保存。
特别说明:
(1)RNA LB1和RNA BB2 含有高盐,在样本加入到此溶液后,病毒会迅速灭活。同时此溶液对皮肤有腐蚀性,务必做好防护,如接触到皮肤,用大量清水冲洗。
(2)样本处理过程中的吸头等材料可能含有病毒分子,实验完毕后务必妥善处理,不能随意丢弃。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,5min速病毒RNA提取试剂盒不得用于其他用途。