本试剂盒采用独特的裂解液，可快速可靠的从细胞、动物组织、植物组织、病毒液样本、抗凝全血、培养细菌中纯化出高纯度的总RNA。该试剂盒是目上操作步骤少、用时短的RNA提取试剂盒（快5分钟）。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。

(1) 本试剂盒中的 Washing Buffer中已经加乙醇，无需单独添加。

(2) RNA LB1和RNA BB2均具有腐蚀性，注意防护。 

（1）裂解/上柱（1.5ml EP管中处理） 

培养细胞：胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，用20~30μl水或PBS 重悬细胞沉淀（务必重悬充分）。加入120μl RNA LB1漩涡混匀30s(有未溶解的细胞团块，用枪头吹打，助溶解)，加入500μlRNA BB2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm 离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

组织样品采用研钵进行研磨：用液氮研磨粉碎组织样本，将研磨粉碎的样品加入到200μl RNA LB1中，漩涡混合均匀1min（有块状组织未溶解的，要使用枪头吹打，助消化），加入500μl RNABB2上下颠倒混合均匀，13000rpm离心15s。将上清倒入吸附柱中（动作需轻柔，勿将未消化的组织块倒入吸附柱），13000rpm 离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。 

组织样品采用钢珠进行研磨：将组织样品加入到300μl RNALB1中（1.5ml EP 管），并加入几粒钢珠，置于组织研磨仪中，研磨1~2min。向研磨后的匀浆液中加入 750μl RNA BB2，漩涡混匀5s，13000rpm离心1min。用1ml吸头吸取750μl上清液到吸附柱中。13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

注意：植物组织的匀浆效果通常较动物组织差一些，所以一般推荐采用液氮条件下研钵来研磨。在采用钢珠研磨的条件下务必将组织研磨粉碎，否则会导致产率降低。 

 

病毒液 /体液 /血清 /血浆：吸取150μl病毒液/体液样品到加入120μlRNA LB1 中，漩涡混合均匀30s。直接加入500μl RNA BB2中，漩涡混合均匀15s。倒入吸附柱中，13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。 

 

培养细菌：收集菌体后，用20~30μl水重悬菌体（务必重悬充分），加入120μl RNA LB1 漩涡混匀30s，加入500μl RNA BB2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。 

 

向吸附柱中加入 500μl Washing Buffer，13000rpm离心15s。重复此步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机，13000rpm空离心1min，将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到2mL NucleaseFree 收集管中，向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O，室温放置1min，13,000rpm离心1min，洗脱液即为提取的RNA，冷冻保存。