固定包埋组织microRNA快速提取试剂盒
本试剂盒用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取包括microRNA的RNA。独特的裂解液/蛋白酶K能迅速裂解细胞释放出RNA,然后裂解混合物通过基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。得到的RNA可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。该产品可在70 min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
请务必在使用本试剂盒之阅读此注意事项
◇ Wash Solution 2/3加入乙醇使用几天后可能出现沉淀晶体,不影响使用,直接吸上清使用即可。
◇ 样品处理量绝对不要超过基因组DNA吸附柱DA和RNA吸附柱RA的处理能力,否则会造成DNA残留或产量降低。不同的组织细胞RNA/DNA相差大,例如胸腺、脾脏DNA含量丰富,超过5 mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×106个细胞就会超过吸附柱吸附能力。因此,若不清楚样品的DNA/RNA含量,可使用较少的样品处理量,如不超过2个10 μm厚度的石蜡切片,再根据实验情况增加或减少样品量。
◇ 裂解液PKD、结合液RBC中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或生理盐水冲洗。
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
◇ 所有离心操作步骤,均可在室温(15-25℃)下进行。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,固定包埋组织microRNA快速提取试剂盒不得用于其他用途。