骨组织RNA快速提取试剂盒
骨组织坚硬、骨细胞密度低、而且外周基质含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA难以分离,无法用传统法进行高质量提取。本试剂盒采用独有的不含苯酚/配方的裂解液,并添加多种成分去除骨组织蛋白多糖。同时基因组DNA清除柱可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖和次代谢产物,裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。该产品可在50min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
请务必在使用本试剂盒之阅读此注意事项
◇ 样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱RA处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,再根据样品试验情况增加或者减少处理量。
◇ 裂解液CLB和RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◇ 取1 mL裂解液CLB至离心管内(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65℃水浴重新溶解),在裂解液CLB中加入100 μL ,颠倒混匀后65℃水浴中预热。多个样品按照比例放大准备。
◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25 ℃)下进行。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,骨组织RNA快速提取试剂盒不得用于其他用途。