微量样品RNA快速提取试剂盒本试剂盒在SPARKeasy无苯酚、RNA快速提取技术基础上,通过基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
试剂盒内独特的裂解液迅速裂解微量样品的细胞和灭活细胞RNA酶,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于特制离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。该产品可在20min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
请务必在使用本试剂盒之阅读此注意事项
◇ 使用请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◇ 裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◇ 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和RNA吸附柱RA处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。如细胞处理量不超过5×105,组织不超过5mg。
◇ Poly Carrier使用方法:如果起始处理量很少,推荐使用Poly Carrier,如果预期有较大量DNA产量,用户可以根据需要选择是否加入Poly Carrier。使用时在每个样品提取所需裂解液RLT Plus中加入4μL Poly Carrier,将裂解液RLT Plus与Poly Carrier溶液充分颠倒混匀即可。也可根据样品数量,在总共需要的裂解液RLT Plus中加入总共需要的Poly Carrier混匀备用,混合液在室温24 h内稳定。
◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇ 如果处理的细胞量小于5000个或者处理组织量小于10μg时,匀浆请在裂解液中加入4μL Poly Carrier(按照注意事项操作)。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,微量样品RNA快速提取试剂盒不得用于其他用途。