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柱式真菌 DNAout 2.0
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品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/10/17 14:19:20更新时间：2024/8/2 10:39:08
产品摘要：柱式真菌 DNAout 2.0既可以采取液氮研磨法破裂真菌，也可用玻璃珠法破碎真菌，两种方法均属于物理 方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外源真菌 DNA（注： 文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌 DNA 污染，用于提取真菌 DNA 往 往会造成污染）.本方法提取一个样品只需要 20 余分钟，方便、快速和高效。
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详细内容
柱式真菌DNAout 2.0
产品简介：
真菌 DNA 提取是一个难题，一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态， 二是因为其细胞壁一般都很厚，比较难以破碎。本产品门用于从真菌孢子和液体培养的真 菌细胞中提取 DNA。
1. 即开即用，提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 既可以采取液氮研磨法破裂真菌，也可用玻璃珠法破碎真菌，两种方法均属于物理 方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外源真菌 DNA（注： 文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌 DNA 污染，用于提取真菌 DNA 往 往会造成污染） 。
3.本方法提取一个样品只需要 20 余分钟，方便、快速和高效。
4.一次可以处理 5 mL 的过夜真菌培养物，所得的基因组 DNA OD260/OD280 一般都在 1.8 左右，长度一般在 20 kb 左右，每 mL 菌液的 DNA 产率一般在 1-3 ug。可以直接用于 PCR 和酶切等后续试验。
产品组成：
| 成分编号 | 大纸盒 | 包装 |
| 柱式真菌 DNAout 溶液 A | 9100303a | 25 mL |
| 柱式真菌 DNAout 溶液 B | 9100303b | 25 mL |
| 柱式真菌 DNAout 溶液 C | 9100303c | 75 mL |
| 离心吸附柱 | 9100303d | 50 套通用 |
| 洗柱液 | 9100303e | 50 mL |
| DNA 洗脱液 2.0 | 9100303f | 10 mL |
| 酸洗玻璃珠，400um | 9100303g | 25 g |
1. 收集菌体或孢子:
1.1、对菌液： 取 3-5 mL 过夜培养的真菌菌液(OD600 一般在 1 以上)到干净的塑料离心管中，12000 rpm
离心 2 分钟弃上清留菌体沉淀。
1.2、对菌落： 用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落（约 50mg） ，转移到装有 1mL 自备无 菌水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000 rpm 离心 2 分钟弃上清留菌体沉淀。
1.3、对孢子材料，一般取 0.1g 左右，直接加入到塑料离心管中，然后进入下一步操作。
2. 在上述真菌材料中加入自备的无菌水 1mL，振荡半分钟后 12000 rpm 离心 2 分钟弃上清留菌体沉淀。此步用于洗涤菌体。
3. 裂解真菌：
3.1、液氮研磨： 在研钵中液氮研磨上述真菌材料成粉，然后转移到干净的离心管中，在离心管中加入500 uL 溶液 A，常温涡旋震荡 3 分钟。
3.2、玻璃珠破碎法： 在没有液氮的条件下，采用此法。在菌体沉淀中加入 500 uL 溶液 A 和 0.5 克的 玻璃珠，常温涡旋震荡 10 分钟
4. 在离心管中加入 500 uL 溶液 B，涡旋震荡 3 分钟，12000 rpm 离心 2 分钟，将上清液全 部转移到一个 5mL 的干净的塑料离心管中。
5. 在上清中加入 3 倍体积的溶液 C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后 均先室温放置 2 分钟，然后 12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面 的操作，直到挂柱步骤完成。
6. 在离心吸附柱中加入 500 uL 通用洗柱液，12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉穿透液。此步可 以洗涤掉杂质。
7. 重复上步操作一次。
8. 12000 rpm 空柱离心1分钟。
9. 加入 50-100 uL DNA 洗脱液2.0，室温放置 1 分钟以上，12000 rpm 离心 1 分钟，穿透液 即为真菌 DNA 样品。
10. 为了得到更多的 DNA 样品，可以重复上步操作1-2 次。
11. 所得 DNA 即可立即使用或放冰箱长期保存。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，柱式真菌DNAout 2.0不得用于其他用途。
热门标签：柱式真菌 DNAout 2.0 制粒DNA提取纯化试剂盒
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