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2×GS Taq PCR Mix
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品牌名称：通蔚生物(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2023/10/17 15:00:23更新时间：2024/8/2 10:39:08
产品摘要：2×GS Taq PCR Mix包含高纯度 GS Taq DNA 聚合酶、dNTPs 以及优化的缓冲体系，浓度为 2×， 只需要添加引 物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增，可有效扩增 3 kb 以内的 DNA 片段。体系中包含有蓝色电 泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 片段相近。
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详细内容
2×GS Taq PCR Mix
保存条件：
-20℃保存 24 个月。
产品简介：
本产品包含高纯度 GS Taq DNA 聚合酶、dNTPs 以及优化的缓冲体系，浓度为 2×， 只需要添加引 物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增，可有效扩增 3 kb 以内的 DNA 片段。体系中包含有蓝色电 泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 片段相近。
使用本产品扩增的 PCR 产物 3’端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于 TA 克隆。
操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增；
快的延伸速度：10~15 s/kb。
适用范围：
适用于常规 PCR 扩增。
1. 请使用高质量的模板进行扩增；
2. PCR Mix 应避免反复冻融，短期内多次使用可置于 4℃保存；
3. 本产品不可用于细菌 16S 鉴定。
操作示例：
按下表配制 PCR 反应体系（冰上操作）
| 组分 | 25 μL 体系 | 50 μL 体系 | 终浓度 |
| 2×GS Taq PCR Mix | 12.5 μL | 25 μL | 1× |
| Primer 1 (10 μM) | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Primer 2 (10 μM) | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Template DNA* | As require | As require |
|
| ddH2O | Up to 25 μL | Up to 50 μL |
|
*模板推荐量：
基因组 DNA：10~1000 ng；
质粒 DNA：1~30 ng。
cDNA：1~2 μL(不超过 PCR 反应总体积的 1/10)。
（以上为推荐的模板使用量，实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异，可根据模板、引物、目的片段的特点设定佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。）
建议的 PCR 条件：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 25 s | 30~35 cycles |
| 退火 | 55~64℃ | 25 s | |
| 延伸 | 72℃ | 10~15 s/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 1~5 min | 1 |
| - | 4℃ | Hold | - |
常见问题与解决办法
Q1：扩增无产物或产物量少？
A1：
(1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
(2) 模板浓度过低。适当增加模板用量；
(3) 引物不合适。优化引物设计；
(4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度；
(5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环；
(6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2：扩增出现非特异条带或弥散带？
A2：
(1) 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
(2) 引物浓度过高。降低引物浓度；
(3) 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板；
(4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序；
(5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，2×GS Taq PCR Mix不得用于其他用途。
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