2×RAPA3G Multiplex PCR Mix
描述:
Multiplex PCR 又称多重 PCR,是指在同一 PCR 反应体系里加上两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR 反应,已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等多个域,特别适用于微量样本的多位点检测。
本制品使用具有强扩增性能的热启动 RAPA3G DNA聚合酶和优化的多重 PCR 反应缓冲液,使其可有效扩增 20重以上的 PCR,具有高的灵敏度,大程度上减少了反应体系优化步骤。
特性:
储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 个月)保存。
请注意:该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短,否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。
3. 电泳:1kb 以内的扩增产物建议使用 3%~4% 琼脂糖凝胶,电压使用 80V,可以有效的分离各扩增片段。
4. 注意事项:
(1)当模板 GC 含量>70%时,请添加 5×Q-Solution。
(2)推荐引物设计原则:引物长度保持在 22 - 30 bp,扩增产物长度在 2kb 以下,GC 含量 50% - 60%,尽量减少各引物之间 TM 的差值。
(3)检测单引物特异性:多重 PCR 反应,应对设计的引物逐一扩增,以确定是否有非特异性扩增和扩增效率。
(4)引物推荐使用浓度:推荐扩增片段<300bp 每条引物的反应终浓度为 0.2-0.3μM,扩增片段>300bp 每条引物的反应终浓度为 0.05-0.15μM,如某些目标片段产量偏低或偏高,可适度调整其对应引物使用量以优化反应结果。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,2×RAPA3G Multiplex PCR Mix不得用于其他用途。