RAPA3G全能PCR Mix
描述:
RAPA3G DNA 聚合酶为经电子重构架的第三代 TaqDNA 聚合酶,第三代 DNA 聚合酶具有高度的杂质耐受性、长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量,这些特点使得RAPA3G 系列产品可用于粗制样品的直接扩增,无需核酸纯化步骤。
该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切酶活性、3’-5’的外切酶活性,产物部分带有”A“尾巴,部分为平末端,因此产物可用于 TA 克隆或平端克隆。
该制品中已经含有溴酚蓝染料,PCR 扩增完毕后可直接点样于琼脂糖凝胶,无需再加入 DNA Loading Buffer。
特点和用途:
(1)高杂质耐受性:该酶可耐受植物中的多糖多酚;全血、血清、血浆中的肝素、高浓度的血红蛋白、甘油三脂、乙醇、胍盐、SDS 等强 PCR 抑制剂。
(2)长片段扩增能力:使用该酶可轻松扩增 8kb 的基因组片段,20kb 的λ DNA,8kb 的 cDNA。
(3) 快速 PCR:该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度,可显著的缩短 PCR 的扩增时间,在常规测试条件下,10s 的延伸时间可完成 1kb 的基因组 DNA 扩增。
(4)高 PCR 成功率:与其它类型的 PCR 扩增试剂对比中,RAPA3G PCR Mix 表现出佳的 PCR 扩增成功率。
(5) 高保真性能:该制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶,因此其具有一定的保真性能(经蓝白斑测试,其保真性能约为 Taq DNA 聚合酶的 56 倍)。
(6)热启动,防止非特异性扩增:RAPA3G 系列产品均采用 HaiGene 有的热启动技术,确保 50 度以下完全无活性,仅有 95 度加热 5min 以后才能恢复其活性,因此可大限度的提高扩增的特异性,减少非特异性产物的产生。
储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 个月)保存。
请注意:
(1)该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短,否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。(2)当扩增片段<1kb时,延伸时间使用 15s;扩增片段 1-2kb 时,延伸时间使用45s,扩增片段 2-3kb 时,延伸时间使用 1min,当扩增片段>3kb 时,请按照 2kb/min 的延伸时间进行设置。
(3)尽管该酶具有 6kb/min 的延伸速度,但按照 2kb/min 设置延伸时间的条件下,能获得高的产量。
3. 电泳:1% 琼脂糖凝胶电泳,上样 5 μl,电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项:(1) 当模板 GC 含量>70%时,请添加5× Q-Solution。(2)当采用全血、血浆等蛋白含量高的样本时,扩增完毕后可能会有变性的蛋白沉淀,请离心后再进行点样和电泳。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,RAPA3G全能PCR Mix不得用于其他用途。