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上海通蔚实业有限公司 主营产品:人白介素试剂盒_大鼠白介素试剂盒_小鼠白介素试剂盒_鸡白介素试剂盒_牛白介素试剂盒_猪白介素试剂盒_羊白介素试剂盒_犬白介素试剂盒_兔白介素试剂盒_猴白介素试剂盒_豚鼠白介素试剂盒_仓鼠白介素试剂盒_鱼白介素试剂盒

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HiPURE高纯度质粒小提中量试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2024/10/29 16:05:56更新时间:2024/12/16 15:28:26

产品摘要: HiPURE高纯度质粒小提中量试剂盒 用于高纯度质粒DNA的小量制备。菌体经碱裂解、高盐、低 pH 处理,质 粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心吸附柱吸附。通过清洗液的洗涤可去除 杂质,在低盐、高pH条件下洗脱,*后得到纯度较高的质粒 DNA 。

产品完善度: 访问次数:171

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手机网站:http://m.yituig.com/c162640/

商铺地址:http://www.tw-reagent.com

原代细胞

核酸提取产品

细胞专用培养基

完全培养基

细胞库

细胞系

血清

生化检测试剂盒

PCR试剂盒

白介素ELISA试剂盒

详细内容


HiPURE高纯度质粒小提中量试剂盒

产品特点

本试剂盒用于高纯度质粒DNA的小量制备。菌体经碱裂解、高盐、低 pH 处理,质 粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心吸附柱吸附。通过清洗液的洗涤可去除 杂质,在低盐、高pH条件下洗脱,*后得到纯度较高的质粒 DNA 。使用本试剂盒每次 可处理 1-5 ml 过夜培养的菌液,所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR 、测序及转染等 各种分子生物学实验。

它具有下列特点:

1. 快捷、高效:操作简便,得率高,节约时间。

2. 纯度高:沉淀致密,去杂干净。

注意:使用前将全部 RNase A 溶液加到 Buffer S1 中混合均匀,2 - 8℃保存;按要求在 Buffer W1  和 W2 中加入无水乙醇

本产品仅供科研使用,不得用于其它用途

保存条件

在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存 12 个月;更长时间的保存可置于 2-8℃ 。若溶 液产生沉淀,应在使用前置于 37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1  应置于 2-8℃ 保存,可稳定保存 6 个月。

使用方法

柱平衡:

向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入400μl 的平衡液BL ,12,000 rpm (-13,400×g ) 离 心 1 min ,弃收集管中滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)

1. 取 1-5 ml 过夜培养的菌液,室温 12,000 rpm 离心 1 min ,尽量将上清去除干净。

注 意:根据菌液的浓度决定取液量,浓度高时取 1.5 ml 菌液离心即可,浓度低时可多收集一次)

2. 加入 250 μl Buffer S1 ,旋涡震荡或用移液器充分吹打使菌体重悬均匀。

注 意:菌体沉淀一定要悬浮均匀,如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解,导致提取的质粒浓度及纯度降低)

3. 加入 250 μl Buffer S2 ,温和颠倒混匀使菌体完全裂解,直到溶液变成清亮、粘稠。

注 意:不可剧烈震荡, 以免造成基因组的污染)

4. 加入350μl Buffer S4 ,立即颠倒混匀,可见絮状沉淀物产生,然后 12,000 rpm 离心 5-10 min,将上清液转移到一干净的离心管中,加入 500 μl 异丙醇混匀。

注 意:Buffer S4 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀)

5. 小心将上清液转移到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心30 sec ,弃收集管中滤液。

6. 向吸附柱中加入 500 μl Buffer W1 ,12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。

注 意:Buffer W1为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖以防酒精挥发)

7. 加入 600 μl Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。

注 意:Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖以防酒精挥发)

8. 加入 500 μl Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。

9. 干燥。将离心吸附柱于 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留漂洗液。

HiPURE高纯度质粒小提中量试剂盒

注 意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响质粒的后续使用)

10. 将吸附柱置于一新的无菌 1.5 ml 离心管(自备)中,加入 100-300 μl 的洗脱液 Buffer EB,室温 12,000 rpm 离心 1 min,离心管底溶液即质粒 DNA。

注 意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH 调整其pH值在7.0 - 8.5之间,为了增加质粒回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 2 min,再次离心收集)

注意事项

1. 细菌培养时间一般为 12-16  小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变。

2. 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S4 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用。

3. 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。


HiPURE高纯度质粒小提中量试剂盒.jpg


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