当前位置: 易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 试剂盒 > 其他试剂盒 > 上海通蔚实业有限公司 > 产品展示 > 核酸提取产品 > 核酸提取系列 > SPEEDYPURE快速质粒小提试剂盒
SPEEDYPURE快速质粒小提试剂盒
企业档案
会员类型:初级版会员
已获得易推广信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
易推广初级版会员:3年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
企业类型:经销商 【已认证】
注册资金:人民币万 【已认证】
产品数:14478
参观次数:1265604
详细内容
SPEEDYPURE快速质粒小提试剂盒
本试剂盒用于质粒 DNA 的小量快速制备。在经典碱裂解法提取质粒的基础上进行改 进优化,可视化操作,可在 10 min 之内完成提取任务,大大降低了提取时间。质粒可从 菌体中快速释放,并特异、高效地被离心吸附柱吸附。所得质粒可直接用于酶切、转化、 PCR 、实时荧光定量,测序等各种分子生物学实验。
它具有下列特点:
1. 快捷、高效:可视化操作,简便高效,节约时间;
2. 纯度高:沉淀致密,去杂干净。
注意:使用前将全部 RNase A 溶液加到 Buffer S1 中混合均匀,2 - 8℃保存;按要求在 Buffer W2 中加入无水乙醇
本产品仅供科研使用,不得用于其它用途
保存条件
在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存 12 个月;更长时间的保存可置于 2-8℃ 。若溶 液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1 应置于 2-8℃ 保存,可稳定保存 6 个月。
1. 取1- 4 ml 过夜培养的菌液,室温12,000 rpm离心1 min ,尽量将上清去除干净。
(注 意:根据菌液的浓度决定取液量,浓度高时取 1.5 ml 菌液离心即可,浓度低时可多收集一次)
2. 加入 200 μl Buffer S1 ,旋涡震荡或用移液器充分吹打使菌体重悬均匀,呈现出均匀混 浊的棕红色。
(注 意:菌体沉淀一定要悬浮均匀,如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解,导致提取的质粒浓度及纯度降低)
3. 加入 200 μl Buffer S2 ,温和颠倒混匀使菌体完全裂解,直到溶液变成清亮、粘稠的紫红色。
(注 意:不可剧烈震荡, 以免造成基因组 DNA 片段的污染)
4. 加入 350 μl Buffer S5 ,立即温和颠倒混匀,可见红黄相间的沉淀物产生,继续混匀直到完全变为黄色,然后 12,000 rpm离心3 min。
SPEEDYPURE快速质粒小提试剂盒
(注 意:Buffer S5 加入后应立即混合,避免产生局部沉淀,如果上清中还有紫色漂浮物,说明复性不充分,继续混匀至溶液颜色完全变为澄清的黄色)
5. 小心将上清液转移到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心30 sec ,弃收集管中滤液。
6. 加入 600 μl Buffer W2 ,室温 12,000 rpm 离心30sec,弃收集管中滤液。
(注 意:Buffer W2为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)
7. 干燥。将离心吸附柱于 12,000 rpm 离心 2 min ,甩干残留漂洗液。
(注 意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响质粒的后续使用)
8. 将吸附柱置于一新的无菌 1.5 ml 离心管(自备)中,加入 50 - 100 μl 的洗脱液Buffer EB, 室温 12,000 rpm 离心 1 min ,离心管底溶液即质粒 DNA。
1. 细菌培养时间一般为 12 - 16 小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变。
2. 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S5 是否形成沉淀,如有沉淀37℃溶解后再用。
3. 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关,一般1.5 ml 过 夜培养菌体可收获约 10μg 高拷贝质粒。
热门标签: SPEEDYPURE快速质粒小提试剂盒 快速质粒小提试剂盒