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上海通蔚实业有限公司 主营产品:人白介素试剂盒_大鼠白介素试剂盒_小鼠白介素试剂盒_鸡白介素试剂盒_牛白介素试剂盒_猪白介素试剂盒_羊白介素试剂盒_犬白介素试剂盒_兔白介素试剂盒_猴白介素试剂盒_豚鼠白介素试剂盒_仓鼠白介素试剂盒_鱼白介素试剂盒

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MaxEndoFree无内毒素质粒大提试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2024/10/30 10:11:23更新时间:2024/12/16 15:28:26

产品摘要: MaxEndoFree无内毒素质粒大提试剂盒用于无内毒素高纯度质粒 DNA 的大量制备与纯化,柱上去除内毒素,操作简单。菌体经改良的碱裂解处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。通过去蛋白液和漂洗液的清洗可去除蛋白及其他杂质,*后得到高纯度的无内毒素质粒 DNA,所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR、测序、细胞转染等分子生物学实验。

产品完善度: 访问次数:157

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原代细胞

核酸提取产品

细胞专用培养基

完全培养基

细胞库

细胞系

血清

生化检测试剂盒

PCR试剂盒

白介素ELISA试剂盒

详细内容


MaxEndoFree无内毒素质粒大提试剂盒

产品特点

本试剂盒适用于无内毒素高纯度质粒 DNA 的大量制备与纯化,柱上去除内毒素,操作简单。菌体经改良的碱裂解处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。通过去蛋白液和漂洗液的清洗可去除蛋白及其他杂质,*后得到高纯度的无内毒素质粒 DNA,所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR、测序、细胞转染等分子生物学实验。

它具有下列特点:

1. 快捷、高效:操作简便,得率高,节约时间;

2. 纯度高:沉淀致密,去杂干净;

3. 内毒素去除简单:柱上去除内毒素,方便快速,清除干净。

保存条件

在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存 12 个月;更长时间的保存可置于 2-8℃ 。若溶 液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1 应置于 2-8℃ 保存,可稳定保存 6 个月。

使用方法

柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 2.5 ml 的平衡液 BL,10,000 rpm离心2 min,弃收集管中滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)

1. 取 100 - 200 ml 过夜培养的菌液,室温10,000 rpm 离心2 min,弃上清。

2. 加入 10 ml Buffer S1,旋涡震荡或用移液器充分吹打使菌体重悬均匀。

注 意:菌体沉淀一定要悬浮均匀,如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解,导致提取的质粒浓度及纯度降低)

3. 加入 10 ml Buffer S2,温和颠倒混匀使菌体完全裂解,直到溶液变成清亮、粘稠。

注 意:不可剧烈震荡,以免造成基因组 DNA 片段的污染,所用时间不要超过5 min,以免质粒受到破坏)

4. 加入10 ml Buffer S4,立即颠倒混匀,可见白色的絮状物产生,然后10,000 rpm离心10 -30 min。小心将上清液转移到一干净的 50ml 离心管中,加入0.3 倍异丙醇混匀。

注 意:Buffer S4 加入后应立即混合,避免产生局部沉淀)

5. 小心将上清液转移到离心吸附柱中,10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中的滤液。

MaxEndoFree无内毒素质粒大提试剂盒

注 意:吸附柱的容积 15 ml,要分多次转入)

6. 向吸附柱中加入 5 ml ToxinOut Buffer,室温静置 5 min,10,000 rpm离心1 min,弃收集管中滤液。

7. 加入 10 ml Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。

注 意:Buffer W2为浓缩液,要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)

8. 加入 5 ml Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。

9. 室温 10,000 rpm 离心 5 min,甩干残留液体。

10. 将离心吸附柱置于一个新的 50 ml 塑料离心管中,打开管盖,放置5 min,使乙醇彻底挥发干净。11. 加入 1 - 2 ml 洗脱液 Buffer EB,室温放置 2 min,10,000 rpm 离心2 min,离心管底溶液即质粒 DNA。

注 意:为增加洗脱效率,可将得到的质粒溶液重新加入到吸附柱中重复步骤11 一次,如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 - 8.5 之间)

注意事项

1. 细菌培养时间一般为 12 - 16 小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变。

2. 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S4 是否形成沉淀,如有沉淀37℃溶解后再用。

3. 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。


MaxEndoFree无内毒素质粒大提试剂盒.jpg

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