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2×TaqPCRMasterMix(无甘油)
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详细内容
2×TaqPCRMasterMix(无甘油)
本产品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为 2×,不含有甘油。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可限度地减少人为误差。
它具有下列特点:
1. 显著提高 PCR 的特异性和灵敏度;
2. 应用简便,减少误差,降低了对 PCR 条件的要求;
3. 本产品不含甘油。
(注 意:以下举例为常规PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)
1. PCR体系
推荐反应体系(20μl)
2. PCR程序
注 意:
A 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
B 延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Taq DNA Polymerase 的扩增效率为1kb/30 sec。
C 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数)
2×TaqPCRMasterMix(无甘油)
3. 结果检测
反应结束后取5 μl反应产物,加入适量上样缓冲液(含染料的不用加),然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。