TaqPlusDNAPolymerase(含预混Mg2+的10×TaqPlusBuffer)

产品特点

Taq Plus DNA Polymerase 是从克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD，经与 Pfu 按一定比例混合而成，该酶可增强扩增的保真性，大大增强扩增的特异性和扩增效率。

Taq Plus DNAPolymerase具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’外切核酸酶活性，较弱的 3’-5’外切酶活性。

在PCR中，该酶延伸速度为 1 ~ 2 kb/min，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。一般用于DN段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等。

使用方法

注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）

1. PCR 体系：

推荐体系（50μl）

A 引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可      提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

B 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板  来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）

2. PCR 程序

注 意：

A 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

b 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq Plus DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/30 sec。

C 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）

TaqPlusDNAPolymerase(含预混Mg2+的10×TaqPlusBuffer)

3. 结果检测：

反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。