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这五种方法可以测试细胞工厂的细胞毒性
细胞毒性是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程,如细胞膜或细胞骨架结构,细胞的新陈代谢过程,细胞组分或产物的合成、降解或释放,离子调控及细胞分裂等过程,导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱,所引发的不良反应。一般检测细胞工厂是否具有细胞毒性可以通过以下方法进行:
1、MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过酶标仪进行检测;
2、LDH的方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性;
3、其它酶方法:如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等;
4、细胞增殖能力分析试剂盒:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态。
5、荧光素发光法细胞生存能力检测:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK具有激活ADP生成ATP。当细胞受损后,细胞膜发生破损,AK会释放到培养上清中。试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光,通过化学发光仪可以定量进行检测。
原创作者:洛阳富道生物科技有限公司