HCoV-229E和HCoV-OC43都是在1960年代发现的，多年来一直被公认为引起普通感冒的原因，并在一生中引起频繁的再感染。在成年人中，这些病毒每年占急性呼吸道疾病的 4％至15％，在高峰期高达35％。儿童的年发病率达到8％，发病率高达20％。据报道，成人中229E和OC43病毒的感染频率为每年每100人15至25人不等，其中有80％的感染者是先前具有该感染病毒抗体的人。

NCBI收录序列为KX344031.1，全长30713bp，基因编码5个结构蛋白：S，M，N，HE和E。

• S蛋白（spike protein）穿过病毒膜，并在冠状病毒“冠状”中形成特征性的尖峰。它被高度糖基化，可能形成同源三聚体，并介导受体结合和与宿主细胞膜融合。刺激中和抗体的主要抗原以及细胞毒性淋巴细胞的重要靶标在S蛋白上。

• M蛋白（membrane glycoprotein）具有一个短的N末端结构域，该结构域在包膜的外表面上突出并跨过该包膜3次，在包膜内留有一个长的C末端。M蛋白在病毒装配中起重要作用。

• 核衣壳蛋白N（nucleocapsid phosphoprotein）与RNA基因组结合形成核衣壳。它可能参与病毒RNA合成的调控，并可能在病毒出芽过程中与M蛋白相互作用。

• HCoV-OC43中发现血凝素酯酶糖蛋白（HE）。血凝素部分与宿主细胞表面的神经氨酸结合，可能使病毒*初吸附到膜上。酯酶从神经氨酸裂解乙酰基。冠状病毒的HE基因与C型流感HE糖蛋白具有序列同源性，可能反映了这两种病毒之间的早期重组。

• 小包膜E（envelope protein）蛋白将其C末端留在包膜内，然后跨越该包膜或弯曲并在内部投射其N末端。

根据CDC和WHO的介绍，针对HCoV-OC43的核酸诊断一般是针对RdRP (RNA-dependent RNA polymerase)、Gene N和Gene E， Gene S更多用于对应药物和疫苗的开发。

以往针对试剂盒检测限的性能评价，一般是选择体外转录的RNA、或者临床阳性病毒来作为标准品，用于性能评价。但是两者都具有很明显的确定，首先体外转录的RNA，一般是很纯，单一，不涉及提取，不符合临床病毒的微环境，因此必然造成检测灵敏度被高估，这也是存在高概率假阴性的主要原因；再次临床阳性病毒，即使是灭活的病毒，也是存在很大的生物安全隐患，因此要求实验室级别为P3-P4，大部分开发诊断试剂盒单位都不满足改要求，另外临床阳性病毒也是来源很有限，不能被稳定供应，反复用于试剂盒的性能评价。

因此，有病毒的完整包膜结构，有HCoV-OC43对应的核酸序列，但是生物安全风险较低的假病毒标准品，的克服了如上的缺点，非常适合用于核酸诊断性能评价的标准品。

科佰生物开发了基于NCBI公布序列的假病毒产品，用于各诊断试剂盒的性能评价，其对应的优点如下：

1. hCov-OC43-RdRP 假病毒标准品，区别于以往体外合成的RNA、临床阳性活病毒，克服两者的缺点，真正适合用于试剂盒的性能评价，包含检测限、特异性，重复性等；

2. 根据HCoV-OC43冠状病毒的特点，选取了RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)、Gene E(envelope protein)、Gene N(nucleocapsid phosphoprotein)合计3个区段的序列，用于假病毒的包装，3个区段很好的表征了HCoV-OC43的特征序列；

3. 科佰生物设计了ddPCR体系的引物、探针序列，可不需要构建标准曲线的前提下完成对假病毒的QC拷贝数检测，非常表征标准品的拷贝数，而且克服了Q-PCR分析CT值的相对判断标准的不性；

4. hCov-OC43-RdRP 假病毒标准品，无致病性，可再生，质控方法，批次间稳定，可以稳定制备和供应，而且要求实验室生物安全级别为P2，满足很多单位的安全需求。