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组织样本处理
点击次数：15575 发布时间：2022/7/13 15:41:12
组织样本处理 （动物组织，肌肉 肝脏 肾脏 大便 植物组织等）
一、组织匀浆的制备
1、取组织块（0.1g～0.5g）少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10/次，间隙30，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），镜检观察:
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
二、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
三、样本保存:
植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保 存三个月,-70℃以下可保存六个月
原创作者：上海初态生物科技有限公司
