您好,欢迎来到易推广 请登录 免费注册

上海初态生物科技有限公司 主营产品:人elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,牛elisa试剂盒,犬elisa试剂盒,鸡elisa试剂盒,鸭elisa试剂盒,山羊elisa试剂盒,豚鼠elisa试剂盒,仓鼠elisa试剂盒,马elisa试剂盒,猴elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,兔elisa试剂盒,绵羊elisa试剂盒,农残elisa试剂盒

易推广认证请放心拨打

15901879664

当前位置:易推广>上海初态生物科技有限公司>技术文章>细胞免疫荧光步骤

企业档案

会员类型:会员

已获得易推广信誉   等级评定
41成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

易推广会员:3

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号: 【已认证】

法人代表: 【已认证】

企业类型:经销商 【已认证】

注册资金:人民币32万 【已认证】

产品数:18147

参观次数:1186408

手机网站:http://m.yituig.com/c163960/

旗舰版地址:http://www.shctbio.com

技术文章

细胞免疫荧光步骤

点击次数:15586 发布时间:2022/8/16 19:34:19

 原理

在进行细胞免疫荧光过程中,需要用到细胞爬片,通过将爬片浸在细胞培养基内,细胞在爬片上生长,进而进行细胞的免疫荧光。
 

材料与仪器

细胞样品
多聚甲醛 70%甲醇 丙酮 PBS Triton  BSA DAPI染液 DABCO Tris 甘油
玻片
 

步骤

细胞爬片免疫荧光实验步骤

天:

1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;

2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;

3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);

4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水纸吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室温封闭30min;

5. 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4℃孵育过夜;

第二天:

6. 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

7. 复染核:滴加DAPI避光孵育5min,对标本进行染核,PBST 5minx4次洗去多余的DAPI;8. 用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,然后在荧光显微镜下观察采集图像。
 

注意事项

1.取细胞爬片时,动作应轻柔,防止将细胞爬片夹碎,影响实验进程。

 

2.种细胞过程中,要注意将细胞轻柔混匀,“八”字或者“十”字形摇晃,防止细胞局部生长过密。

原创作者:上海初态生物科技有限公司

相关产品

中国彩虹热线
在线咨询

提交