您好,欢迎来到易推广 请登录 免费注册

上海初态生物科技有限公司 主营产品:人elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,牛elisa试剂盒,犬elisa试剂盒,鸡elisa试剂盒,鸭elisa试剂盒,山羊elisa试剂盒,豚鼠elisa试剂盒,仓鼠elisa试剂盒,马elisa试剂盒,猴elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,兔elisa试剂盒,绵羊elisa试剂盒,农残elisa试剂盒

易推广认证请放心拨打

15901879664

当前位置:易推广>上海初态生物科技有限公司>技术文章>上海初态生物科技有限公司实验方法

企业档案

会员类型:会员

已获得易推广信誉   等级评定
41成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

易推广会员:3

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号: 【已认证】

法人代表: 【已认证】

企业类型:经销商 【已认证】

注册资金:人民币32万 【已认证】

产品数:18147

参观次数:1185705

手机网站:http://m.yituig.com/c163960/

旗舰版地址:http://www.shctbio.com

技术文章

上海初态生物科技有限公司实验方法

点击次数:15600 发布时间:2022/5/25 22:13:42

 上海初态生物科技有限公司

实验方法

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。

根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA,即我们通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA,称为斑点ELISADot-ELISA;再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA,称为布ELISAC-ELISA)。

在微量板ELISA中,又根据其性质不同分为间接ELISA、双抗体夹心ELISA、双夹心ELISA、竞争ELISA、阻断ELISA及抗体捕捉ELISA

1、间接ELISA

本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下:

(1) 材料

① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;

DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;

ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

(2) 方法步骤

① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 加待检血清 → 372小时,洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 372小时,洗涤三次、抛干

④ 加底物液 → 3730分钟,加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。

(3) 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件成立的情况下,如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性,否则判为阴性。

2、双抗体夹心ELISA

本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。

① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 3730分钟,洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 3730分钟,洗涤三次、抛干

④ 加底物液 → 3715分钟,加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

3、双夹心ELISA

此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。

此法的基本程序为:

① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 加待检抗原(Ag) → 3760分钟,洗涤三次、抛干

③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(Ab-2)→ 3760分钟,洗涤三次、抛干

④ 加入酶标抗Ab-2抗体(AB-3)→ 3760分钟,洗涤三次、抛干

⑤ 加底物液 → 3720分钟,加终止液

⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。

 网址:www.shctbio.com上海初态生物科技有限公司

邮箱:1043411210@qq.com电话:159 0187 9664本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!

原创作者:上海初态生物科技有限公司

相关产品

中国彩虹热线
在线咨询

提交