ELISA的基本原理有三条：

（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；

（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；

（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。

由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上，因而，具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物，它可以催化底物分子发生反应，产生放大作用，正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一种既敏感又特异的方法。

ELISA的样本收集与期准备：

利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液（指血，静脉血），尿，粪便，脑脊液，胸腹水，列腺液，精液，阴道分泌物等，这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

(一) 临床样本的收集ELISA的样本实验准备

在收集样本都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行

检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

    液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1. 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2. 血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3. 尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

5. 培养细胞

 检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6. 组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心

质量保证及售后服务:

一、购买方严格按照包装上注明的贮藏条件贮藏因购货方对产品保管不善而产生的产品质量问题由购货方负责。

二、我司所提供的一切产品，均为科研试剂，仅供科研和实验用。

三、如因运输造成的货物损坏，由供方与运输方协调解决，需方不承担由此产生的损失。因不可抗力因素造成我司延期交货或无法交货的，我司将及时通知买方而不承担任何损失。

四、在质量保证期间内，如有下列情况者，我公司将视情况收取材料费。

1、为依据说明手册上所指示的工程序和环境使用所致的损坏;

2、非我公司技术人员维修所致的损坏;

五、质量保证期从购买之日起，为期半年。本公司产品仅用于科研。为客户服务!

操作流程:

稀释－－加样－－温育－－配液－－洗涤－－加酶－－温育-洗涤－－显色－－终止－－测定

1.有质量问题免费包换，合同上注明了的(质量问题包括运输不当，客户在使用过程中测不出结果，等等!)

2全程技术指导(包括售的标本收集，使用过程中不明白的地方，实验结束后的数据分析，有任何疑问，我们技术都会即时给你去电

3提供免费代测的服务。(你只需把标本寄过来，我们为你节省时间，帮你出结果，原始数据，分析数据均可提供，一般时间是5天左右)

4客户有任何问题，我们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是竭诚为客户服务!