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兔白细胞介素3(IL-3)ELISA试剂盒初态生物
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病理染色
缓冲液
抗体(标签抗体、内参抗体、一抗、二抗)
来样检测服务
生化试剂盒
详细内容
产品名称:兔白细胞介素3(IL-3)ELISA试剂盒
保存条件:2-8度
供应商:初态生物
保质期:6个月
性状:液体
可测样本数48T:多可测样本42个96T:多可测样本90个
研究域:新陈代谢、信号传导、免疫学、细胞生物学、肿瘤、神经生物学等相关域的生命科学研究。
供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等
检测波长:450 nm
标本:血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、心房水、细胞培养上清、组织匀浆等标本
试剂盒性能:特异性强、重复性好、稳定性高、超灵敏度
原理
双抗夹心 ELISA 法是指将特异性针对待测抗原的抗体包被于 96 孔微孔板 中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中待测抗原与连接于 固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的针对待测抗原的抗体,形成夹心, 将未结合的生物素化抗体洗净后,加入 HRP 标记的亲和素,再次彻底洗涤后加 入 TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下 转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测抗原呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(O.D.值),用于样本中待测抗原浓度测算。
夹心法ELISA:
1. 加样:将标准品工作液依次加入到两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100 μL。待测样品加入到其他孔,每孔100 μL(若样本浓度高于检测范围,需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给酶标板覆膜,37℃孵育90分钟。提示:加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,避免产生气泡。加样时间宜控制在10分钟内。
2. 生物素化抗体/抗原:弃去液体,甩干,不用洗涤。每个孔中立即加入生物素化抗体/抗原工作液100 μL,混匀,酶标板加上覆膜, 37℃孵育1小时。
3. 洗涤:甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350 μL,浸泡1-2分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤3次。提示:此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。
4. HRP酶结合物:每孔加酶结合物工作液100 μL,混匀,加上覆膜,37℃孵育30分钟。
6. 底物:每孔加底物A,B各50μL加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短或延长孵育时间,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止。
7. 终止:每孔加终止液50 μL,终止反应。提示:终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。
8. 读值:立即用酶标仪在450 nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提打开酶标仪预热,设置好检测程序。
9. 实验完毕后,将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至保质期。
【注意事项】
1、试剂盒置2℃~8℃保存。
2、使用试剂应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加。
3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条,置室温平衡30分钟后再行测试,余者应及时封存于冰箱中以备后用。
4、待测标本不可用NaN3防腐。
5、不同批号试剂请勿通用。
6、结果判断须在10分钟内完成。
7、若浓缩洗涤液出现结晶时,请置37℃至溶解。
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
阴性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
阳性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
初态生物是一家集科学研究、生产,技术服务,实验文化传播于一体的集团化企业,总部落于上海,我们严守标准,履行合同,工程优质,我们秉承“追求顾客满意度,追求员工满意度,追求市场满意度”我们致力于各种ELISA试剂盒、抗体、生物试剂等优质科研产品的研发、销售,免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。企业微信:15901879664
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