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NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)测试盒微量法初态生物
价格:¥1280
品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/6/10 22:22:08更新时间:2024/10/10 15:50:39
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缓冲液
抗体(标签抗体、内参抗体、一抗、二抗)
来样检测服务
生化试剂盒
详细内容
检测方法:微量法、可见分光光度法、HPLC法、差速离心法、火焰光度法、荧光法
规格:100管/48样、50管/24样
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
1. 细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液), 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);8000g 4℃ 离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2. 血清(浆)样品:直接检测。
3. 丙酮酸钠标准液:取 100µL 标准液,倍比稀释至 1、0.5、0.25、0.125、0µmol/mL,用2、1、0.5、0.25、0.125、0µmol/mL 做标准曲线。
二、测定操作表:
1. 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 450nm,蒸馏水调零。
2. 样本测定
试剂名称(µL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 |
待测样本 | 10 | 10 | - |
标准液 | - | - | 10 |
试剂一 | 50 | 50 | 50 |
试剂二 | 10 | - | - |
蒸馏水 | - | 10 | 10 |
充分混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)准确水浴 15min
试剂三 | 50 | 50 | 50 |
充分混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 15min
试剂四 | 150 | 150 | 150 |
充分混匀,室温静置 3min,取200µL 转移至微量玻璃比色皿或在 96 孔板中,450 nm 下测定吸光度,计算∆A=A 测定管-A 对照管。每个测定管需要设一个对照。
根据标准管测定值和浓度做标准曲线,y 为标准品浓度,µmol/mL;x 为对吸光度(减去浓度为0 的标准管的OD 值)。
网址:www.shctbio.com上海初态生物科技有限公司
邮箱:1043411210@qq.com电话:159 0187 9664本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
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