检测方法：微量法、可见分光光度法、HPLC法、差速离心法、火焰光度法、荧光法

规格：100管/48样、50管/24样

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿。

试剂组成和配制

提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5mL 蒸馏水充分溶解。

试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5 mL 蒸馏水充分溶解。

试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5 mL 蒸馏水充分溶解。

试剂五：液体×1 瓶，4℃避光保存。

酶液提取

1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入1mL

提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3，间隔7，总时间3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置冰上待测。

3. 液体：直接检测。

按照液体体积计算

酶活单位定义：每毫升液体每分钟消耗 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

FDA（nmol/min /mL）= ΔA÷（ε×d）×V 反总÷V 样÷T=321.54×ΔA

V 反总：反应体系总体积，1mL；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×10 3 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g

注意事项

配制好的试剂二、试剂三、试剂四 3 天内使用完。

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