（UDP-glucose pyrophosphosphprylase ，UGP）试剂盒说明书

紫外分光光度法

注意：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

UDPG焦磷酸化酶是生物体糖原合成过程中的关键酶。在葡萄糖合成糖原催化葡萄糖活化，将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖（UDPG）。

测定原理

UGP可逆催化反应生成1磷酸葡萄糖，在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将 NADP转化为NADPH，340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1mL石英比色皿。

试剂组成和配制

提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5mL 蒸馏水充分溶解。

试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5 mL 蒸馏水充分溶解。

试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用加 5 mL 蒸馏水充分溶解。

试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

酶液提取

1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g 离心10min，取上清置冰上待测。

2. 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3，间隔7，总时间3min）；然后4℃，10000g 离心10min，取上清置冰上待测。

3. 液体：直接检测。

测定操作

1. 分光光度计预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2. 取1mL石英比色皿，依次加入500μL试剂一，100μL试剂二，100μL试剂三，100μL试剂四，100μL试剂五，100μL粗酶液，充分混匀，记录340nm处30s的吸光值A1和330s的吸光值A2，△A=A2-A1

上海初态生物科技有限公司主要经营各种品牌档次的试剂盒，品质保证，售后服务完善。并提供免费代检测。服务于高校及免疫学科研单位。技术人员更好的为您服务。

（注：本试剂只用于科研，欢迎来电咨询!）

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