方法类型和操作步骤

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

一双抗体夹心法

双抗体夹心法是检测抗原常用的方法，操作步骤如下：

⑴将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。

⑵加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

⑶加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

⑷加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。

产品规格： 96T/48T

价  格： 96T/1880;48T/1280元

可测样本数;(96T：多可测样本90个.48T:多可测样本42个)

保存与运输：4℃保存；低温运输

现货状态： 1000

产品资料： 实验方法技术资料

供 应 商： 上海初态生物科技有限公司

使用范围：  仅限科研使用，不能应用于临床

  在收集样本都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行

检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

    液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1. 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2. 血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3. 尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

5. 培养细胞

    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6. 组织标本

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

初态生物科技产品：

初态生物科技有限公司

是一家集科研、生产和销售为一体的业化的高科技企业。初态生物为生命科学实验提供高品质的产品。初态生物产品涵盖抗体、生化试剂盒、ELISA试剂盒等系列产品。上海初态生物科技有限公司公司秉承“保证一流质量，保持一信誉”的经营理念，坚持“客户至上”的原则为广大客户提供优质的服务。

注： 为保证结果准确且避免试剂损失，测定请仔细阅读说明书（以实际收到说明书为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，过程中有问题请您及时与工作人员联系。

网址：www.shctbio.com上海初态生物科技有限公司

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