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原理
天狼猩红和其衬染液都是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢靠。偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折来射光的属性,与天狼星红染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原源纤维。
实验流程
石蜡切片脱蜡至水→天狼猩红染色→脱水封片→镜检
实验结果
光学显微镜下胶原纤维红色,背景黄色;偏振光下,Ⅰ型胶原呈橘黄色或亮红色的粗纤维,Ⅲ型胶原呈绿色的细纤维。
注意事项
①做石蜡包埋样本保存及运输:常温置于4%多聚甲醛固定液内保存及运输(需注意固定液的量好是组织的10倍以上,样本需完全浸泡于固定液内并防止样本贴壁固定不良,大标本好使用大的标本瓶/袋运输,建议在大标本上按取材包埋要求做多条平行切口,以防标本中心固定不透彻。运输过程中防止固定液渗漏)。
②做冰冻切片样本保存及运输:冰冻切片制片应取用新鲜组织,-80℃或液氮保存,干冰运输。
③样本接收:石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片
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