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原理
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞后,被水解生成DCFH。而DCFH不能透过细胞膜。细胞内的ROS可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。DCF被488nm激发光激发后,发射530nm的荧光信号,被FITC通道接收,检测DCF的荧光就可以判定细胞内活性氧ROS的水平。
实验流程
收集细胞→PBS清洗→JC-1工作液孵育→荧光显微镜观察或流式细胞仪分析
注意事项
样品为带培养基的活细胞,常温运输
应用:
1、ROS可对细胞膜结构、核酸和蛋白分子产生氧化作用,引起其结构和功能障碍。
2、ROS增多会导致机体产生氧化应激反应(Oxidative Stress)造成细胞损伤
3、ROS参与多种病理机制,百种以上的疾病状态都可能有ROS的参与。
4、检测细胞ROS的含量,可以了解ROS在细胞一些生理和病理状态中的变化,分析药物效应和相关机制
武汉傲星生物科技有限公司是一家专注于为生命科学研究,医学研究,病理学研究,药物研究等提供基础科研技术服务和科研产品的技术企业。我们主要提供的技术服务包括动物模型、分子生物学、免疫学、蛋白质学、细胞生物学、病理毒理病毒相关服务,可为国内外研发机构与药企提供专业的生物研发检测合作、科技成果转化项目指导以及各类专项定制的 CRO 服务。依托细胞及实验动物为主要研究对象,解析人类疾病发病机制及药物疗效、药物作用靶点筛选及作用机制,助力生命科学研究领域新的突破,为生物技术发展持续创造价值。旨在为广大科研工作者提供专业的科研解决方案和培训计划。