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ELISA检测

点击次数:14发布时间:2023/11/27 10:31:53

ELISA检测

更新日期:2024/4/12 9:27:25

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验。

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实验概念

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验。

实验流程(具体步骤以说明书为准):

取出ELISA试剂盒→封闭→洗涤→加入一抗→洗涤→加HRP标记的二抗→洗涤→底物显色→加入终止液→酶标仪读数→数据分析

送样本要求

样本形式

处理方式

保存

运输

血清

干燥管(黄色)或促凝管(红色)收集全血,室温自然凝固10-20min,离心5-10min(2500-3500rpm/min)。采血过程中应避免溶血,仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心

-20℃或更低

冰袋或干冰

血浆

抗凝管(紫色、黑色、绿色)收集全血,采集后马上混匀,静置10min左右,离心5-10min(2500-3500rpm/min)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心

-20℃或更低

冰袋或干冰

尿液

用无菌管收集,离心10-20min(2500-3500rpm/min),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心

-20℃或更低

冰袋或干冰

粪便

用无菌15ml离心管收集, 1g样本+9ml PBS(0.01M,pH=7.4),充分匀浆完离心5-10min(2500-3500rpm/min),取上清备用

-20℃或更低

冰袋或干冰

胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液

同尿液

-20℃或更低

冰袋或干冰

细胞

检测分泌性的成份:用无菌管收集,5-10min(2500-3500rpm/min),仔细收集上清

-20℃或更低

冰袋或干冰

细胞内指标:吸去培养板内的培养基,胰酶消化细胞,收集细胞沉淀,PBS(0.01M,PH=7.4)清洗一次,PBS稀释细胞悬液,细胞浓度达到1×107/ml左右,充分研磨后超声裂解(或反复冻融),以使细胞破坏并放出细胞内成份,离心5-10min(2500-3500rpm/min),取上清备用

 

 

动物组织

用无菌15ml离心管收集,组织重量不能低于50mg1g组织加入9ml PBS(0.01M,PH=7.4),手工或匀浆器将标本匀浆充分,匀浆过程中,PBS2次加进去,这样匀浆更充分。充分匀浆完离心5-10min(2500-3500rpm/min)。取上清备用(切勿加入细胞裂解液)

-20℃或更低

冰袋或干冰

植物组织

用无菌15ml离心管收集,组织重量不能低于50mg,1g组织加入9ml PBS(0.01M,PH=7.4),手工或匀浆器将标本匀浆充分,匀浆过程中,PBS分2次加进去,这样匀浆更充分。充分匀浆完离心5-10min(2500-3500rpm/min)。取上清备用(切勿加入细胞裂解液)

-20℃或更低

冰袋或干冰

牛奶

8000转高速离心,离心后分三层,层是脂肪层,中间层是乳清,底层是固态蛋白,取中间层保存备用。乳清量参照血清量。

-20℃或更低

冰袋或干冰

注意事项;
           1.避免反复冻融,样本处理之后可分装密封保存。4度保存应小于1周,-20度不超过3个月,-80度不超过12个月。在标本使用应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。
           2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性,从而导致假阴性的结果。

血常规样本为EDTA-K2抗凝的全血样本,抗凝管紫色头盖管,收集混匀不能凝血,样本量不能少于0.2ml。当天检测,此检测为全套结果,不单独检测某一项或者几项。
           凝血四项(凝血功能):包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB) 常见的凝血4指标。样本为枸橼酸钠抗凝的全血样本。
           以上两种样本采集样本后需要在24h内进行实验;
           样本保存温度为常温,如果室温超过37℃,需要低温2-8℃保存运输。

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联系人:李女士

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