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实验概念
流式细胞术(flow cytometry, FCM)是一项新型的 、发展迅速的生物医学分析技术,它是集激光技术 、光电测量技术、 计算机技术、 流体力学以及细胞免疫荧光化学技术 、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。 流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。它使细胞或微粒在液流中流动,逐个通过一入射光束,并用高灵敏度检测器记录下散射光及各种荧光信号,从而得以对粒子进行多参数分析,包括诸如粒子形状和大小、 细胞周期、 细胞内细胞因子、 细菌表面抗原、细胞DNA内含物等。FCM检测的粒子一般为活性细胞,通过激光光源激发细胞上所标记的荧光物质的强度和颜色以及散射光的强度可以得到细胞内部各种各样的生物信息。另外FCM还可进行细胞分选,可以根据所检测细胞的某种性质进行分选,并且如果分选的过程是在无菌条件下进行的,这些细胞还可以用来培养。科拜生物具有丰富的流式检测经验，从单色荧光标记到多色荧光标记，从凋亡、周期到MPTP、CFSE等，从流式分析到流式分选，可提供流式检测服务。
实验流程
细胞培养及处理→荧光标记（探针、抗体等）→上机检测/流式分选→流式数据分析
注意事项
1.流式检测样本 |
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样本形式 | 处理方式 |
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血样 | 当天采集的血液，置于抗凝管中，建议血量≥2mL，单个血样对应分组较多时应适当加大采血量 | 4小时之内完成淋巴细胞分离 |
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组织 | 新鲜标本离体后置于PBS中，4℃保存运输。离体时间不可超过24小时。 |
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细胞 | 武汉本地客户可以将培养细胞的孔板交予销售带至实验室，需要用封口膜密封，防止漏液。外地客户需将有活力的细胞置于培养瓶中常温快递至公司检测 |
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注意事项： |
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2.其他检测 |
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检测形式 | 处理方式 | 保存 | 运输 |
流式细胞周期检测 | 将细胞正常消化后，冷PBS悬浮细胞，之后缓慢加入4℃预冷无水乙醇固定，乙醇终浓度75% | -20℃ | 冰袋 |
流式细胞凋亡检测 | 将细胞正常消化后，PBS洗一遍，PBS重悬 | 必须当天送样 | 冰袋 |
Tunel细胞凋亡检测 | 有活力的细胞，弃去培养液，PBS冲洗后，加入足量4%多聚甲醛，培养板附上保鲜膜，盖上板盖，胶布缠裹固定，避免固定液体流出 | 4℃ | 冰袋 |
原代分离实验 | 无菌采取完整的组织块，新鲜组织离体后置于无菌培养基中 | 离体时间不可超过4小时 | 冰袋 |
血小板的分离 | 需要选择医用真空采血管获得抗凝血，全过程样本均需在20±2℃的条件下进行。为获得佳的实验结果，好在取血2h内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过6h后分离效果更差甚至不能达到分离目的。 | 4℃ | 冰袋 |
