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抗体亲和力测定
亲和力是评价可逆反应过程中两个分子间相互作用强弱的特征参数,是了解分子以及识别生物学过程、药物的发现与筛选等的重要指标。在药物早期研究开发、筛选鉴定、以及下游生产质控等多方面有重要意义,而且在生命科学基础研究、生物制药开发等域也有广泛应用。依托于完善的平台构建,泰克生物着力于为客户提供高品质的一站式技术服务,满足不同客户的实验需求。
█ 服务类型
泰克生物基于Octet和Biacore等平台为客户提供准确、快速的亲和力测定服务,根据客户需求提供各具特色的分子间相互作用分析服务,包括但不限于业内常用的检测技术:表面等离振子共振(Surface plasmon resonance, SPR)和生物膜干涉技术(Bio-Layer Interferometry, BLI),检测结果准确、客观、可信。我们着力于为客户提供结果准确的检测服务,满足不同客户的实验需求。
BLI亲和力测定:是一种光学分析技术,检测的是生物传感器上固定的生物分子表面层厚度的变化。若待测分子与生物传感器尖端的固定相分子发生结合,其数量的变化可致实时测定的干涉图谱发生相应改变,进而得到分子间相互作用信息。
SPR亲和力测定:通过将一个分子固定在传感芯片表面的形式,将另一分子以溶液形式连续流过芯片,检测器可以实时检测到溶液中分子与芯片表面分子的结合、解离过程。SPR通过实时记录传感器芯片表面分子质量变化,实时监测分子间相互作用信息。
█ 亲和力测定值的意义
IC50:通常指半抑制浓度(或称半抑制率),即IC50,对特定的生物过程(或该过程中的某个组分比如酶、受体、细胞等)抑制一半时所需的药物或者抑制剂的浓度。在药学中用于表征拮抗剂(antagonist)在体外实验(in vitro)中的拮抗能力。
EC50:通常是指在特定的暴露时间后,能达到50%生物效应对应的药物、抗体或者毒素等的浓度。在药学中除了用于表征体外实验中(in vitro)激动剂(agonist)的激活能力外,还可用于表示达到体内(in vivo)生物效应一半时所需的血药浓度。
KD:解离常数(dissociation constant),为50%的酶E被抑制剂I结合时对应的游离抑制剂的浓度。某些情况下,可与KI等同。KD一般通过SPR等实验测定,一般不存在底物;而KI测定时,是同时存在底物的,有底物参与竞争。所以一般测定的KI会比KD要大。
█ 样品要求
样品类型 | 要求 |
抗体,蛋白,多肽,化合物小分子等 | * 缓冲液:PBS, HEPPS等不含有机试剂,不含Tris,EDTA或DDT; * 蛋白样品(含抗体):200ug,浓度>0.5mg/ml; * 多肽样品:200ug,浓度>1mg/ml; * 化合物小分子:1mg,浓度>1mg/ml,纯度>90%,溶于100%DMSO或者水中。 |
█ 服务优势
✔ 多样化检测平台,满足不同检测需要
✔ 高准确度分析仪器,经验丰富的操作以及严格的质量管理,结果准确可靠
✔ 检测效率高,无需标记,可实现高通量检测,检测过程实时监控
✔ 方法设计更加便捷,简单灵活易操作
✔ 仪器检测灵敏度更高,样品消耗量更低
✔ 抗干扰能力强:检测不受温度、缓冲液折射率等外界环境影响
✔ 应用范围广泛:可用于蛋白、核酸、多肽、纳米材料等分子互作分析
✔ 提供真正的一站式服务体验:提供从亲和力测定服务,到分子互作研究的一体化解决方案
原创作者:泰克生物科技(天津)有限公司