上海轩泽康生物致力于为广大高校、科研院所和企业单位提供的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。选择轩泽康生物，为您提供一站式服务（售、售中、售后），在线技术一对一指导和免费待测服务。我司从严格的质控体系、产品优化、客户体验等多方面为重点，加强并完善ELISA产品。推出了一系列高敏ELISA试剂盒。

上海轩泽康生物高敏ELISA试剂盒推荐：

人促黄体激素（LH）

酶联免疫吸附测定试剂盒

本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

l  本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人促黄体激素（LH）的含量。

l  有效期：6个月

l  保存条件：2-8℃

试剂盒组成：

1.（96T/48T）打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。

2.标准品浓度依次为：200、100、50、25、12.5、0 mIU/mL
3.经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

检测准备工作：
1.请提20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃
3.20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

人促黄体激素（LH）酶联免疫吸附测定试剂盒样本处理及要求：
1.血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4.细胞培养物上清：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
5.其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
6.样品外观：样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。
7.样品保存：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

人促黄体激素（LH）酶联免疫吸附测定试剂盒实验原理：试剂盒采用双抗体二步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人促黄体激素(LH)捕获抗体包被微孔中，依次加入标本、标准品孵育，加入生物化抗体进行抗体生物素化，经过温育并彻底后加入HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人促黄体激素（LH）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

实验所需自备试验器材：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水

人促黄体激素（LH）酶联免疫吸附测定试剂盒操作步骤：
1．从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2．设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3．样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。样本如需稀释，按照要求用试剂盒配套样本稀释液稀释样本。
4．每孔加入生物素标记抗体50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育30min；标准孔空白孔不加！
5．弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6．除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
7．弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
8．每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

9．每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

试剂盒性能：

1.检测范围：5 mIU/mL – 200 mIU/mL。

2.灵敏度：低检测浓度小于1.0 mIU/mL。

3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

实验结果计算：绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。