在ELISA检测过程中，时常会有检测结果与实际结果不符的情况出现。实验室的环境因素（包括室内设施设备、温度、湿度、采光照明、电磁干扰、电源质量等）都可能影响ELISA分析质量。
①实验室温度影响，尤其是弱阳性标本
 在进行ELISA检测时，试剂及保存的标本在检测均要与室温（23℃±2℃）平衡。如果室温变化过大，25℃下能检出的标本15℃下平衡后，同样的温育程序则可能检测不出来。实验室的温度过高、过低可能使仪器性能变差。
②实验室湿度影响
湿度过低时静电作用变得明显，仪器处理标本或贮存标本的塑料器皿易吸附带电微粒，引起标本的沾污。
湿度过高可能会造成仪器上有水汽凝结，甚至仪器部件生锈等情况出现。因此，实验室应维持适当的温度盒湿度。
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