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大鼠20S蛋白酶体(20SP)elisa试剂盒#2022文章已更新
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详细内容
一.产品名称:大鼠20S蛋白酶体(20SP)elisa试剂盒
产品规格:48T/96T(可拆)
产品数量:咨询
产品品牌:上海轩泽康生物
产品应用:ELISA实验
抗体反应性:小鼠
抗体标记:HRP标记
产品货期:现货
实验目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、细胞上清及相关液体样本中XXX的含量。
研究域:免疫学Immunology
检测波长;450nm
保存条件:试剂盒未拆开,4℃保存。已拆开,标准品-20℃保存,其他4℃。
二.大鼠20S蛋白酶体(20SP)elisa试剂盒#2022文章已更新实验原理实验:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被该指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻、底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
三.上海轩泽康生物大鼠20S蛋白酶体(20SP)elisa试剂盒组成:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:如需了解详细说明书和操作步骤请与我司客服联系
四.上海轩泽康生物ELISA试剂盒技术指南:
关于ELISA试验的稳定性问题
1. 做ELISA实验时,结果老是重复性不上,相同的材料和相同的操作方法做出的结果就截然不同,上午做时OD在1.5,下午做时就是0.9了,所以都没有办法下结论,为什么会差异这么大呀?
答:(1)多设平行空孔;请别人代劳,以判断究竟是否操作问题。
(2)对于活性非常高的包被物和酶标记物,如果第、一次选择的范围恰好在其平台位置边缘。那么在重复的时候每次取样带来的微量误差就很容易导致大的偏差了。特别时线性比较好的原料试剂,这个就很正常了。建议每次取样的时候只使枪尖一点点位于液面下,以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗体或酶而使结果重复不上。
2. 酶不稳定,有何高招?大鼠20S蛋白酶体(20SP)elisa试剂盒#2022文章已更新
答:(1)保存浓度尽量高些。
(2)另外可以添加牛血清蛋白等蛋白保护剂,以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。
(3)加入50%甘油-20℃保存,避免反复冻融。
(4)还可以加入防腐剂防止长菌(注意不能使用叠氮钠,其对HRP活性有很大影响)
(5)现在一些公司也有商品化的酶标保护剂供应,可以考虑一下。酶类的稳定性与保存方法有很大的关系。干燥的制品一般比较稳定,在低温情况下其活性可在数日甚至数年无明显变化,贮藏要求简单,只要将干燥的样品置于干燥器内(内装有干燥剂)密封,保持0-4℃冰箱即可。液态稳定性较差,贮藏时应注意以下几点:1.样品不能太稀,必须浓缩到一定浓度才能封装贮藏,样品太稀易降解、变性。2.一般需加入防腐剂和稳定剂,酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等,也可加入底物和辅酶以提高其稳定性。此外,钙、锌、硼酸等溶液对某些酶也有一定保护作用。3.贮藏温度要求低,避免反复冻融。
3.ELISA试验中不加标本的OD值反而高于加的阴性标本的OD值,是什么原因呢?
答:、大的原因时封闭的效果不好,应该调整封闭液。可以尝试不同的封闭剂(BSA、胶脂奶粉、明胶等)、不同的封闭浓度、时间,试试哪个效果好。阴性的里面的其他蛋白起到了封闭的效果。