小鼠TNF-αELISA检测试剂盒简介及操作原理

TNF-α：免疫调节与炎性反应的关键角色

肿瘤坏死因子α（TNF-α），又称为TNF，是一种重要的炎性细胞因子，主要由巨噬细胞、T细胞、B细胞、单核细胞、脂肪细胞、活化的单核细胞、成纤维细胞等多种细胞分泌。它是一种可溶性的157个氨基酸的蛋白质（17.4 kDa），对应于全长跨膜蛋白的C端胞外结构域。TNF-α在机体的免疫系统中起着关键的作用，并参与多种生理和病理过程。

主要功能与特性

1. 免疫调节作用：TNF-α具有广泛的免疫调节功能，可以促进细胞的增殖、活化和转化，从而增强机体的免疫反应。

2. 促炎作用：TNF-α是一种强烈的促炎细胞因子，能够介导炎症反应，促进炎症细胞的浸润和炎症介质的释放。

3. 抗肿瘤作用：尽管名称中包含“肿瘤坏死因子”，但TNF-α在肿瘤发生发展的不同阶段可能表现出复杂的作用。一方面，它可以促进肿瘤细胞的凋亡和坏死；另一方面，在某些情况下，它也可能促进肿瘤的生长和转移。

4. 参与病理状态：TNF-α在许多病理状态下产生增多，包括败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭、慢性炎性疾病等。

临床应用

1. 自身免疫性疾病治疗：TNF-α在自身免疫性疾病的发病机制中起着重要作用，因此，针对TNF-α的抑制剂被广泛应用于治疗这些疾病，如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎等。

2. 炎性疾病治疗：TNF-α也参与了一些炎性疾病的发病过程，如细菌性心内膜炎、病毒性心肌炎等，因此，针对TNF-α的治疗也可能对这些疾病有益。

药物开发

基于TNF-α在炎症反应和免疫调节中的关键作用，研究人员开发了一些针对TNF-α的药物，主要包括TNF-α抑制剂。这些抑制剂可以分为两类：

1. 重组人TNF受体：如依那西普（Etanercept）和英夫利西单抗（Infliximab），它们通过结合TNF-α并阻断其与受体的结合，从而减轻炎症反应、改善疾病症状。

2. TNF-α抗体：如阿达木单抗（Adalimumab）和培塞利珠单抗（Certolizumab），它们同样通过结合TNF-α并阻止其与受体的结合，降低炎症反应和免疫细胞的活性。

注意事项

虽然TNF-α在机体的免疫系统中起着重要的作用，但其过度表达或异常激活也可能导致严重的病理后果。因此，在使用针对TNF-α的药物时，需要在医生指导下进行，以避免可能的不良反应和并发症。同时，对于TNF-α水平的监测和评估也是临床诊断和治疗过程中的重要环节。

小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中TNF-α含量的实验工具。以下是对该试剂盒的详细介绍：

一、基本原理

小鼠TNF-α ELISA试剂盒基于酶联免疫吸附测定（ELISA）的原理。该试剂盒中预包被了特异性抗小鼠TNF-α的抗体。当加入样本后，样本中的TNF-α会与这些抗体结合。随后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。在加入底物后，酶催化底物反应产生颜色变化，颜色的深浅与样本中TNF-α的浓度呈正相关。通过酶标仪在特定波长下测定吸光度（OD值），即可计算出样本中TNF-α的含量。

二、产品特点

1. 特异性高：对小鼠TNF-α具有较高的特异性识别能力，能准确检测目标物质，减少非特异性干扰，确保检测结果的准确性。

2. 灵敏度高：可以检测到较低浓度的TNF-α，有助于发现早期的生理或病理变化。

3. 操作简便：试剂盒提供了详细的操作说明书，实验人员按照步骤进行操作即可，不需要复杂的仪器设备和专业的技术培训。

4. 稳定性好：在合适的储存条件下，试剂盒的试剂能够保持较好的稳定性，保证检测结果的重复性和可靠性。

5. 应用范围广：可用于基础医学研究、药物研发以及动物实验等多个领域。

三、规格与保存

该试剂盒通常有48t和96t两种规格可供选择。未开封的试剂盒应贮存于2-8℃。打开的试剂盒或重组试剂中的部分组分，如显色底物A、B、终止液、20×洗液、样本稀释液、标准品、HRP标记抗体等，在2-8℃条件下大约可贮存14天，建议在规定时间内使用以保证检测效果。

四、操作流程

1. 试剂、样本平衡：检测之前需将所有的试剂、样本平衡至室温，标准品、质控品和样品建议做复孔。

2. 加样：设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品，样本孔加待测样本，空白孔不加。

3. 加HRP标记抗体：除空白孔外，标准品孔和样本孔加入HRP标记的检测抗体。

4. 孵育：使用封板膜封板，在适宜的温度下孵育一定时间。

5. 洗涤：弃掉液体，用洗液洗板多次，移除残留液体。

6. 加底物显色：每孔加入显色底物，在适宜的温度下孵育一定时间，产生颜色变化。

7. 加终止液：每孔加入终止液，颜色发生变化。

8. 检测读数：在规定时间内，使用酶标仪在特定波长下检测读数，计算样本中TNF-α的含量。

五、注意事项

1. 严格按照说明书的要求进行样本的采集、处理和保存，以及实验操作的温度、时间等条件控制。

2. 不同批次的试剂盒可能会存在一定的差异，建议在使用新批次的试剂盒时进行预试验验证。

3. 该试剂盒仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

综上所述，小鼠肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒是一种高效、准确的实验工具，可广泛应用于科研和临床前研究中。

原创作者：上海杰普斯生物科技有限公司