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公司新闻
干货课堂 | ELISA 数据处理
点击次数：88发布时间：2024/8/9
ELISA实验完成后，*重要的工作就是将OD值转化为浓度了，那么如何进行呢？首先，我们要绘制标准曲线，目前绘制标准曲线常用的方法有Excel绘图或者专用的Curve软件作图。常规的拟合回归方程有以下6种：
1、直线拟合，方程y=ax+b
2、二次多项式拟合，方程 y=ax?+bx+c
3、三次多项式拟合，方程y=ax?+bx?+cx+d
4、半对数拟合，方程y=alg(x)+b
5、Log-Log拟合，方程lg(y)=alg(x)+b
其中四参数拟合曲线，*能满足ELISA数据分析的要求，是*常见的ELISA 数据分析的方法。下面我们以使用ELISAcalc为例，采用四参数拟合方程来处理ELISA 数据。
1、将数据输入Excel预处理。
标准品浓度(pg/ml) | OD值1 | OD值2 | 平均值 | 矫正值 |
0 | 0.053 | 0.046 | 0.05 | 0 |
15.625 | 0.089 | 0.092 | 0.091 | 0.041 |
31.25 | 0.145 | 0.146 | 0.146 | 0.096 |
62.5 | 0.279 | 283 | 0.281 | 0.231 |
125 | 0.463 | 0.454 | 0.459 | 0.409 |
250 | 0.833 | 0.831 | 0.832 | 0.782 |
500 | 1.379 | 1.372 | 1.376 | 1.326 |
1000 | 2.081 | 2.088 | 2.085 | 2.035 |
2、下载EISAcalc软件（如果需要该软件，可以联系客服，），双击ELISAcalc，得到下面界面。
3、选择四参数曲线拟合。
4、输入标准曲线的浓度和OD值。
5、点击回归/拟合，得到拟合曲线。
6、点击回归方程，得到方程数据。
得到A、B、C、D的值，并且可以看到R2=0.99982，说明实验成功。
7、如果样本比较少，点击由Y计算X，将样本OD值输入ELISAcalc，即可得到对应的浓度
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