大鼠nectin-4()ELISA检测试剂盒#2023动态已更新《采购新闻/推荐》详细介绍

规格: 96T/48T

检测波长:450 nm

所需样本体积: 50-100ul

适用范围:仅供科研

保存及有效期:2-8℃，六个月

检测目的:用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

大鼠nectin-4()ELISA检测试剂盒#2023动态已更新《采购新闻/推荐》

ELISA实验标本的采集、处理和保存

能够应用ELISA 实验的样本种类很多，有血清，血浆，细胞上清，细胞裂解液，尿液，关节滑液，脑脊液，肺泡灌洗液，各种组织的组织匀浆；采集和处理的方式都不相同。下面就列出了biotnt 收集的给类样本的采集、处理和保存方式。方法大多出自文献和试剂盒说明书，部分方法经Biotnt 验证过，但有的方法并没有实际操作过，所以，以下方法仅供参考。

一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存；

1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中；

2、 采血后室温静置1小时；

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 

大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有化物酶活性的物质，以HRP为标记的 ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特显色。此外还应避免细菌污染，因为菌体中可能含有含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜 时检测。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。

二、ELISA实验中血浆的采集、处理和保存；

1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中；

2、 按1:9加入抗凝剂（EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠），30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心5min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求，建议使用EDTA。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。

注意事项：制备血浆标本需借助于抗凝剂EDTA,抗凝不完全的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。

三、ELISA 实验中尿液的采集、处理和保存；

1、 采集尿液样本500ul，加入无菌试管中；

2、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的样本留上清，弃下面沉淀。

3、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

四、ELISA 实验中脑脊液的采集、处理和保存；

1、采集脑脊液样本，加入无菌试管中；

2、将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的样本留上清，弃下面沉淀。

3、取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

五、ELISA 实验中细胞上清液的采集、处理和保存；

1、采集细胞培养上清液500ul，加入无菌试管中；

2、将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

3、取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

六、ELISA 实验中细胞裂解液的采集、处理和保存；（需要测蛋白浓度）

1、 取细胞培养板或细胞悬液，用PBS（PH7.2-7.4）洗涤细胞培养板1-2次。

2、 通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂（裂解液），使细胞破坏并放出细胞内成份。

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心20min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

七、ELISA 实验中肺泡灌洗液的采集、处理和保存；

1、 10%水合氯醛溶液，腹腔麻醉。

2、 打开腹腔，另取10ml注射器行下腔静脉采血，尽可能将血放尽。

3、 在冰面上对左肺进行肺灌洗。取37℃生理盐水5ml，分三次灌洗：2ml、1.5ml、1.5ml灌洗。回收率在70%以上。

4、 将肺泡灌洗液用离心机4℃，1500rpm离心10min。

5、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

6、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

八、ELISA 实验中关节滑液的采集、处理和保存；

1、 口腔关节：患者取坐位，常规消毒后，作皮下及关节后区局部浸润麻醉。然后嘱患者大张口，采用装有2ml生理盐水的注射器（5号针头）作关节上腔 穿刺，髁后进针，针尖方向斜向、内、上，抵达关节结节后斜面后稍后退，回抽如发现有淡黄色液体，即表明已进入关节上腔，注入2ml生理盐水，反复注入、 回抽五次。

   膝骨关节滑液：无菌穿刺取得关节液。

2、 将关节液用离心机4℃，1500rpm离心15min，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

3、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

九、 ELISA实验中各类组织匀浆（容易匀浆的组织）的采集、处理和保存；（需要测蛋白浓度）

1、 采集组织，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，剔除附属的结缔组织，称取组织块。

2、 用移液管量取0.1M PBS或者用0.86％冷生理盐水，匀浆介质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍，用眼科小剪尽快剪碎组织块（天然时操作要在冰水浴中进行，将盛有组织 的小烧杯放入冰水中）。

3、 匀浆的方式有多种： 

a) 手工匀浆：将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀浆，左手持匀浆管将下 端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，使组织匀浆化。

b) 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000r/min上下研磨制成10％组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10/次，间隙30，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。

4、 将制备好的10％匀浆用离心机4℃，3000rpm离心15min，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

5、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

6、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

十、ELISA实验中各类组织匀浆（不易匀浆的组织）的采集、处理和保存；（需要测蛋白浓度）

7、 采集组织，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，剔除附属的结缔组织，称取组织块。

8、 用移液管量取0.1M PBS或者用0.86％冷生理盐水，匀浆介质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍，用眼科小剪尽快剪碎组织块（天然时操作要在冰水浴中进行，将盛有组织 的小烧杯放入冰水中）。

9、 匀浆的方式有多种： 

a) 手工匀浆：将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀浆，左手持匀浆管将下 端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，使组织匀浆化。

b) 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000r/min上下研磨制成10％组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10/次，间隙30，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。

c) 超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用40安培，5/次，间隙10反复3～5次。

10、 将制备好的10％匀浆用离心机4℃，3000rpm离心15min，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

11、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

12、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

二.订货信息： 大鼠nectin-4()ELISA检测试剂盒#2023动态已更新《采购新闻/推荐》

【特点】

1、产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简便

2、免费提供产品报价、实验原理、产品用途及中英文说明书

3、发货及时（南京本地客户有门人员送货上门及取标本）

4、免费提供ELISA代测

 注意事项：

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

大鼠nectin-4()ELISA检测试剂盒#2023动态已更新《采购新闻/推荐》的服务：

一、产品有问题免费包换；

二、提供免费代测服务（为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性）；

三、提供全程技术指导。

大鼠nectin-4()ELISA检测试剂盒#2023动态已更新《采购新闻/推荐》

将目标抗体包被于微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。matters needing attention:

1. The kit can be used only after it is taken out of the cold storage environment ａnd balanced at room temperature for 15-30 minutes. If it is not used up after the enzyme label package is unsealed, the strip should be put into a sealed bag for storage.

2. The concentrated washing solution may he crystallization. When diluted, it can be heated in the water bath to help dissolve, ａnd washing will not affect the results.

3. The sampler shall be used for each sampling step, ａnd its accuracy shall be checked frequently to oid test error. It is better to control the sampling time within 5 minutes at a time. If there are many samples, it is recommended to use a row gun for sampling.

4. Please make a standard curve at the same time of each measurement, ａnd it is better to make a hole. If the content of the substance to be measured in the sample is too high (the sample OD value is greater than the OD value of the first hole of the standard hole), please dilute the sample diluent to a certain multiple (n times) before measuring. Please multiply the total dilution multiple when calculating（ × n × 5）。

5. The sealing membrane is only used once to oid cross contamination.

6. Keep the substrate away from light.

7. The operation shall be carried out in strict accordance with the instructions. The determination of the test results must be based on the reading of the enzyme marker

8. All samples, detergent ａnd various wastes shall be treated as infectious substances.

9. The components of different batches of this reagent shall not be mixed.