XL-10-Gold化学感受态
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详细内容
XL-10-Gold 是目转化效率高的感受态细胞,可用于大质粒或珍贵连接产物转化或构建文库。XL-10-
Gold 菌株为 Hte (high transformation efficiency)基因型,是可特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力
的宿主菌基因型,已成功应用于 40 kb 质粒的构建。XL-10-Gold 几乎缺失了所有已知的限制酶切系统,同时缺
失了核酸内切酶(endA),因此可以提高质粒 DNA 的产量和质量。同时,重组酶缺陷型(recA)减少了插入片段的
同源重组概率,保证了质粒的稳定性。菌株带有四环素和氯霉素抗性,并可用于蓝、白斑筛选
实验。经 pUC19 质粒转化检测,XL-10-Gold 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。
产品组成
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
BW25113 | CC96162-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96162-02 | 100×100ul | 4,250 | |
DB3.1 | CC96182-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96182-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DGF298 | CC96158-01 | 10 ×100ul | 5,000 |
CC96158-02 | 100×100ul | 42,500 | |
DH10B | CC96101-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96101-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10B plus | CC96193-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96193-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10B T1 | CC96108-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96108-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10Bac | CC96136-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96136-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH12S | CC96128-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96128-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH5α | CC96102-01 | 10 ×100ul | 120 |
CC96102-02 | 100×100ul | 1,020 | |
EPI300 | CC96163-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96163-02 | 100×100ul | 4,250 | |
EPI400 | CC96177-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96177-02 | 100×100ul | 2,745 | |
GB05-dir | CC96157-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96157-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GB08-red | CC96156-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96156-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GB2005 | CC96154-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96154-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GBred-gyrA462 | CC96153-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96153-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GT115 | CC96176-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96176-02 | 100×100ul | 4,250 | |
HB101 | CC96174-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96174-02 | 100×100ul | 1,938 | |
INV110 | CC96137-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96137-02 | 100×100ul | 2,745 | |
INVαF | CC96138-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96138-02 | 100×100ul | 2,745 |
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