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ArcticExpress(DE3) pRARE2)感受态
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产品简介ArcticExpress (DE3) pRARE2 来源于 ArcticExpress (DE3),将具有氯霉素抗性的 pRARE2 质粒导入
ArcticExpress (DE3)细胞中即是 ArcticExpress (DE3) pRARE2。ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株染
色体 DNA 中整合了 λ 噬菌体 DE3 区,使得 ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株可同时表达 T7 RNA
聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,广泛用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等质粒的蛋白表达。
ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株具有四环素,庆大霉素,氯霉素抗性;endA1 突变有利于质粒
DNA 的稳定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3) pRARE2 可以表达适应低温的伴侣
蛋白 Cpn10 和 Cpn60(来自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10 和 Cpn60 伴侣蛋白在 4-12 ℃表现
出较高活性,在 ArcticExpress(DE3) pRARE2 细胞中表达时,可降低重组蛋白包涵体的形成,增加
可溶重组蛋白的表达量及生物活性,比传统的原核表达伴侣蛋白 GroEL、GroES 等具有更加优异的
促融能力。同时,pRARE2 质粒可补充大肠杆菌缺乏的 7 种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA,
CCC, GGA 和 CGG)对应的 tRNA,提高外源基因的表达水平。吐露港生产的 ArcticExpress (DE3)
pRARE2 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化效率达 108cfu/μg DNA。
产品组成
组分
ArcticExpress(DE3)pRARE2
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2
(CamR)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
BW25113 | CC96162-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96162-02 | 100×100ul | 4,250 | |
DB3.1 | CC96182-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96182-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DGF298 | CC96158-01 | 10 ×100ul | 5,000 |
CC96158-02 | 100×100ul | 42,500 | |
DH10B | CC96101-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96101-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10B plus | CC96193-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96193-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10B T1 | CC96108-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96108-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH10Bac | CC96136-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96136-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH12S | CC96128-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96128-02 | 100×100ul | 1,938 | |
DH5α | CC96102-01 | 10 ×100ul | 120 |
CC96102-02 | 100×100ul | 1,020 | |
EPI300 | CC96163-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96163-02 | 100×100ul | 4,250 | |
EPI400 | CC96177-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96177-02 | 100×100ul | 2,745 | |
GB05-dir | CC96157-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96157-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GB08-red | CC96156-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96156-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GB2005 | CC96154-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96154-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GBred-gyrA462 | CC96153-01 | 10 ×100ul | 1,000 |
CC96153-02 | 100×100ul | 8,500 | |
GT115 | CC96176-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96176-02 | 100×100ul | 4,250 | |
HB101 | CC96174-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96174-02 | 100×100ul | 1,938 | |
INV110 | CC96137-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96137-02 | 100×100ul | 2,745 | |
INVαF | CC96138-01 | 10 ×100ul | 340 |
CC96138-02 | 100×100ul | 2,745 |
联系方式:
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