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NovaBlue (DE3)感受态
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产品简介NovaBlue(DE3)来源于 K12 菌株,具有高的转化效率,是转化效率高的原核表达菌株,可同时
用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体 DNA 中整合了噬菌体 λDE3 序
列,使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)
菌株具有四环素抗性,endA1 和 recA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
lacZΔM15 突变使得 NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑实验筛选。经 pUC18 质粒转化检测,NovaBlue
(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。
产品组成
组分
NovaBlue(DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- [proA+B+ lacI q ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12- mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)
存储条件
-80 ℃保存,请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
HMS174 (DE3) | CC96124-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96124-02 | 100×100ul | 4,250 | |
JM109(DE3) | CC96166-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96166-02 | 100×100ul | 2,907 | |
M15(pREP4) | CC96190-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96190-02 | 100×100ul | 2,907 | |
MG1655(DE3) | CC96171-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96171-02 | 100×100ul | 4,250 | |
NovaBlue (DE3) | CC96125-01 | 10 ×100ul | 500 |
CC96125-02 | 100×100ul | 4,250 | |
Origami 2 | CC96115-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96115-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Origami 2 (DE3) | CC96116-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96116-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Origami 2 (DE3) pLysS | CC96114-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96114-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Origami B | CC96144-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96144-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Origami(DE3) | CC96178-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96178-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta | CC96139-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96139-02 | 100×100ul | 1,938 | |
Rosetta (DE3) | CC96109-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96109-02 | 100×100ul | 1,938 | |
Rosetta (DE3)pLacl | CC96111-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96111-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta (DE3)pLysS | CC96112-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96112-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2 | CC96143-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96143-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2 (DE3)pLacl | CC96113-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96113-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2 (DE3)pLysS | CC96110-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96110-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2(DE3) | CC96185-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96185-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta Blue | CC96142-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96142-02 | 100×100ul | 2,907 |
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