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Rosetta 2(DE3)感受态
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Rosetta 系列菌株来源于 BL21 系列宿主菌,该系列菌株含有原本在大肠杆菌中稀少的真核细胞密码子,增加了真核细胞的蛋白表达水平。Rosetta 2(DE3)来源于 Rosetta(DE3),本菌株含有 pRARE2 质
粒,除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密
码子的 tRNA 外,还提供了第七个稀有密码子 CGG 的 tRNA,这使得该宿主菌相对于其他大肠杆
菌,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。DE3 是溶源性的 λDE3 序列,
可表达T7 RNA聚合酶,因而适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列的载体。值得注意的是,
pRARE2 质粒具有氯霉素抗性。Rosetta 2(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化
效率达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Rosetta 2(DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB– mB–) dcm gal (DE3) pRARE2 (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL, argX)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
Rosetta 2 | CC96143-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96143-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2 (DE3)pLacl | CC96113-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96113-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2 (DE3)pLysS | CC96110-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96110-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta 2(DE3) | CC96185-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96185-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta Blue | CC96142-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96142-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami 2 | CC96145-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96145-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami 2 (DE3) | CC96117-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96117-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl | CC96120-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96120-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami 2 (DE3)pLysS | CC96121-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96121-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami B | CC96146-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96146-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami B (DE3) | CC96118-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96118-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gami B (DE3)pLysS | CC96122-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96122-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Rosetta-gamim B (DE3)pLacl | CC96119-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96119-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Shuffle T7 Express lysY | CC96161-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96161-02 | 100×100ul | 2,907 | |
T7 Express | CC96159-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96159-02 | 100×100ul | 2,907 | |
T7 Express lysY/Iq | CC96172-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96172-02 | 100×100ul | 2,907 | |
TB1 | CC96189-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96189-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Tuner | CC96141-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96141-02 | 100×100ul | 2,907 | |
Tuner(DE3) | CC96180-01 | 10 ×100ul | 360 |
CC96180-02 | 100×100ul | 2,907 |
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