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AGL1感受态
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产品简介AGL1 菌株为 C58,RecA 型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因 Rif 和羧苄青霉素抗
性基 因 Carb ,为了便于转化操作 ,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型 Ti 质粒 pTiBo542DT
DNA ,此质粒含有 vir 基因 ( vir 基因是 T-DNA 插入植物基因组必需的元件,pTiBo542DT-DNA
质粒自身的 T-DNA 转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体 T-DNA 顺利转移)。
pTiBo542DT-DNA 型 Ti 质粒含有筛选标签:Strep,赋予 AGL1 菌株链霉素抗性,适用于水稻、拟
南芥、杨树等植物的转基因操作,经 pCAMBIA2301 质粒检测转化效率 ≥ 5×103 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
AGL1
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:C58 RecA (Rif R/CarbR) Ti pTiBo542DT-DNA (StrepR) Succinamopine
存储条件
-80 ℃保存; 请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除琥珀碱型 Ti 质粒 pTiBo542DT-DNA 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥5×103 cfu/μg pCAMBIA2301 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分
钟(或干冰乙醇浴和-80℃冰冻)、37℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟;
3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基,于 28℃振荡培养 2~3 小时;
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天(当平板只含有 50 μg/ml Kan 时,28 ℃培养 48 h 即可;平板中同
时加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 时,需 28 ℃培养 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 则需要 28 ℃
培养 72-90 h)。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 利福平浓度不应高于 25 μg/μl,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率;
4.因为 Ti 质粒丢失的概率低(可以忽略),所以一般培养农杆菌时不考虑添加相应抗生素。
GV3101 | CC96304-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96304-02 | 100×100ul | 1600 | |
GV3101(pSoup) | CC96305-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96305-02 | 100×100ul | 1600 | |
GV3101(pSoup-19) | CC96303-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96303-02 | 100×100ul | 1600 | |
GV3101(pJlC SA-rep) | CC96308-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96308-02 | 100×100ul | 1600 | |
EHA105 | CC96301-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96301-02 | 100×100ul | 1600 | |
EHA105(pSoup) | CC96314-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96314-02 | 100×100ul | 1600 | |
AGL1 | CC96307-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96307-02 | 100×100ul | 1600 | |
AGL1(pSoup) | CC96309-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96309-02 | 100×100ul | 1600 | |
LBA4404 | CC96302-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96302-02 | 100×100ul | 1600 | |
EHA101 | CC96306-01 | 10 ×100ul | 240 |
CC96306-02 | 100×100ul | 1600 |
电话:17321241593 手机:17321241593 联系人:Tina Q Q:1503472510
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