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上海语纯生物科技有限公司 主营产品:细胞系,原代细胞,血清,培养基,胰酶,双抗,动物红细胞,白细胞,血浆

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NCI-H209+LUC人小细胞肺癌细胞+LUC

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:1×10^6 原产地:中国大陆 发布时间:2023/11/29 9:59:07更新时间:2024/11/11 14:29:46

产品摘要:冻存细胞的复苏:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

产品完善度: 访问次数:393

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手机网站:http://m.yituig.com/c168418/

商铺地址:http://www.ycswcell.com

详细内容

联系方式:
电话:17321241593 手机:17321241593 联系人:Tina   Q Q:1503472510
 细胞特性

种属人源(Homo sapiens

组织来源肺(Lung

疾病癌症(Carcinoma

年龄未知(Unknown

性别男(Male

细胞形态圆形细胞(Round cells

生长特性悬浮生长(Suspension

含量:>1x10^6  细胞数

规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

用途:仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

11mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在45X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后传代建议T25培养瓶12传代 。               

一.培养基及培养冻存条件准备:

1 RPMI1640培养基+10%FBS+1%P/S双抗

2 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存收到细胞后建议在培养3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

 

联系方式:
电话:17321241593 手机:17321241593 联系人:Tina   Q Q:1503472510
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