ELISA (酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗ti的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一-种敏

感性很高的实验技术。由于抗原、 抗ti的反应在一种固相载体-聚苯Z烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗ti的间接法、用于检测抗原的双抗ti夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目我们对客户提供比较常用的ELISA双抗ti夹心法及ELISA间接法服务。

实验过程:

1.试剂准备:所有试剂都必须在使用达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请 使用一次性的吸头,避免交叉污染。

2.加样:加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，第yi个孔与hou-一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育“时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品) 将控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。

3.孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态:同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响hou的酶标仪读数。

ELISA试剂盒操作注意事项：

1）试剂应按标签说明书储存，使用恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质使用。

4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法：

1）血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。

试剂盒的储存及有效期：

未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。

使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

稳定性：

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。

为减小外部因素对试剂盒破坏后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

免责声明

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

 试剂和样本的控制方法:

一、试剂

1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。

2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。

二、样本

1.内源性干扰因素:包括类因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;

类因子的控制方法:

①用F(ab)2替代完整的IgG;

②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;

③检测抗原时,可用2-巯ji乙醇加入到标本稀释液中使RF降解;

补体的控制方法:

①用EDTA稀释标本;

②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;

2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;

控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。

 订购说明:

※关于产品售价,由于市场的不稳定性,价格变动是必然的,但是我们可以提供当下公允的市场价格,批量订购还可享受相应的优惠活动;

※关于产品的具体信息,本页面展示的内容仅供参考,而详细的产品信息,可以咨询我们;

※关于运费问题,批量订购可免邮,本品采用低温箱冷冻保存;

※关于服务,我们提供完整的售售后服务,并贯穿你的整个实验过程,如遇技术问题,可随时联系我们,我们真诚地为您答疑解惑。