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技术文章
上海富衡 | 防止细胞聚集的实验室策略
点击次数:12 发布时间:2024/12/2 9:50:27
在实验室细胞培养过程中,细胞聚集是一个常见的问题,它可能会影响细胞的正常生长、实验结果的准确性等诸多方面。为了防止细胞聚集,科研人员通常会采用多种有效的方法。
首先,合适的细胞培养容器表面处理至关重要。许多细胞培养瓶和培养皿会经过特殊的表面处理,例如用亲水性的聚合物涂层。这种涂层可以降低细胞与容器表面之间的非特异性吸附,减少细胞之间因为吸附在同一位置而聚集的可能性。比如,在培养某些贴壁细胞时,经过超亲水涂层处理的培养器皿能够使细胞更均匀地分布在表面,就像在一个光滑而又 “友好” 的平面上生长,而不是彼此堆积。
酶处理也是常用的手段。在细胞消化传代过程中,使用适量的胰蛋白酶等酶试剂。胰蛋白酶能够分解细胞间的连接蛋白,使细胞彼此分离。但是,酶的浓度和处理时间需要严格把控。如果酶浓度过高或者处理时间过长,虽然细胞能够很好地分散,但可能会对细胞造成损伤,影响细胞的活性。以常见的哺乳动物细胞为例,一般使用 0.25% 的胰蛋白酶,在 37℃下处理 1 - 3 分钟,就可以有效地将细胞分散开,同时又能保证细胞的健康状态。
添加合适的试剂也是防止细胞聚集的有效策略。一些抗聚集剂如乙二胺四乙酸(EDTA)被广泛使用。EDTA 能够螯合细胞培养液中的钙、镁离子,而这些离子是细胞间连接所依赖的重要成分。当它们被螯合后,细胞间的连接就会变弱,从而减少聚集。在一些细胞培养配方中,会含有适量的 EDTA,浓度通常在 0.02% - 0.1% 之间,这样可以在不影响细胞正常生理功能的情况下,有效地防止细胞聚集。
在细胞培养过程中,轻柔的操作也不容忽视。无论是在细胞的接种、换液还是转移过程中,避免剧烈摇晃或吹打。可以使用带有柔软橡胶头的移液器,缓慢而均匀地吹打细胞悬液,使细胞能够均匀分散,而不是因为外力作用而相互碰撞聚集在一起。通过这些综合的方法,实验室能够更好地防止细胞聚集,为细胞培养实验的成功提供保障。
原创作者:上海富衡生物科技有限公司