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技术文章

ELISA检测试剂盒保存和使用要点

点击次数:105 发布时间:2024/10/24 16:37:14

检测试剂盒保存要点
温度平衡:

从冷藏环境中取出的检测试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后再使用,以确保试剂达到适宜性能。

开封后的酶标包被板如未用完,应装入密封袋中保存,防止干燥和污染。
结晶处理:

浓洗液可能会有结晶析出,可以在水浴中加热助溶,但这不会影响清洗效果。
加样操作:

各步骤的加样均应使用加样器,并定期校正其准确性,以减少实验误差。
一次加样时间应控制在4分钟内,如果标本数量较多,建议使用排枪加样。
标准曲线和复孔:

每次测定应同时制作标准曲线,并做复孔,以提高结果的准确性和可靠性。
如果标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔的OD值,应先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时终乘以总稀释倍数(×n×5)。
封板膜的使用:

封板膜只能一次性使用,以防止交叉污染。
固相夹心法:

进口ELISA试剂盒采用固相夹心法,即已知浓度的标准品和未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将生物素标记的抗体同时温育,然后洗涤去除未结合的抗体。
亲和素标记的HRP:

加入亲和素标记的HRP,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物。
底物反应:

加入底物A和B,与酶结合物同时作用,产生颜色变化。
颜色的深浅与样品中的待测物质浓度呈比例关系。
详细解释
温度平衡:

室温平衡:从冷藏环境中取出的试剂盒需要在室温下平衡15-30分钟,以确保试剂的温度一致,避免因温度差异导致的实验误差。
密封保存:未用完的酶标包被板应装入密封袋中,防止空气中的湿气和污染物进入,影响后续实验结果。
结晶处理:

结晶析出:浓洗液中的某些成分可能会在低温下结晶,这在稀释时可以通过水浴加热溶解,不会影响清洗效果。
加样操作:

加样器:使用加样器可以确保每次加样的准确性和一致性,减少人为误差。
加样时间:一次加样时间应控制在4分钟内,以确保所有样本在同一时间内完成加样,避免时间差异带来的误差。
排枪加样:对于大量样本,使用排枪可以提高产率和准确性。
标准曲线和复孔:

标准曲线:每次测定应同时制作标准曲线,以确保结果的准确性和可比性。
复孔:做复孔可以减少偶然误差,提高结果的可靠性。
稀释:如果样本中待测物质含量过高,应先稀释后再测定,计算时需考虑稀释倍数。
封板膜:

一次性使用:封板膜只能一次性使用,避免交叉污染,确保每个实验的独立性和准确性。

总结
温度控制:确保试剂盒在2-8°C冷藏保存,使用在室温下平衡15-30分钟。
结晶处理:浓洗液如有结晶,可在水浴中加热溶解。
加样操作:使用加样器并控制加样时间,建议使用排枪处理大量标本。
标准曲线和复孔:每次测定制作标准曲线并做复孔,必要时进行样品稀释。
封板膜:封板膜只能一次性使用,防止交叉污染。

 

原创作者:上海卡凯希生物科技有限公司

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