可检测种属

（人，小鼠，大鼠，植物，鱼，虾，蟹，牛，羊，狗，猫，微生物，细胞，土壤等动植物）

可以检测样本为

（血清，血浆，唾液，尿液，组织，细胞上清，裂解液等）

产品检测目的

样本水平表达（定量检测，定性检测，酶活性检测）

一、、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、限度的节省实验经费。

常用方法及原理如下：

1. 夹心法：

夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为:

a. 将具有一性的抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体

b. 加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结

c. 洗去多余待测检体，加入另一种对抗原一的一次抗体，与待测抗原进行键结

d. 洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结

e. 洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果

原理：针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2. 间接法

间接法常用于检测抗体，一般的操作步骤为：

a. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行一性键结。

c. 洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。

d. 洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

原理：利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。

3. 竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：

a. 将具有一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体

b. 加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结

c. 加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。

d. 洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。

e. 当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。

人曲霉菌（a.nidietans）ELISA试剂盒原理：将特抗体包被于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，另一组只加酶标记抗原，经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。